حامی فایل

مرجع دانلود فایل ,تحقیق , پروژه , پایان نامه , فایل فلش گوشی

حامی فایل

مرجع دانلود فایل ,تحقیق , پروژه , پایان نامه , فایل فلش گوشی

روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی

اختصاصی از حامی فایل روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی


روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی

دانلود مقاله روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی

 نوع فایل Word دانلود انواع تحقیق

تعداد صفحات : 115

فهرست محتوا 

  • فصل اول
  • مقدمه:
  • تاریخچة اهمیت کشت بافت:
  • اساس گیاه شناسی برای کشت بافت:
  • اهداف مورد نیاز با استفاده از تکنولوژیهای جدید کشت بافت و مهندسی ژنتیک:
  • فصل دوم
  • تاریخچه: 
  • اهمیت اقتصادی:
  • گیاهشناسی یونجه:
  • آب و هوا:
  • کاربرد بیوتکنولوژی در اصلاح یونجه:
  • مهندسی ژنتیک:
  • فصل سوم
  • کشت بافت
  • فصل سوم
  • بررسی منابع:
  • کشت بافت یونجه:
  • 4- باززایی
  • 3-3- اثرات زمینه ژرم پلاسم در باززائی:
  • انواع کشت بافت گیاهی:
  • کشت سوسپانسیون:
  • مراحل رشد کشت سلولی:
  • بذر مصنوعی یونجه و کاربرد آن:
  • کاربرد بیوتکنولوژی:
  • پتانسیل بذور مصنوعی:
  • کاربرد بذر مصنوعی:
  • امکانات مورد نیاز برای کشت بافت و سلول گیاهی:
  • مواد و روشها:
  • انتخاب ارقام یونجه:
  • روش تهیه محیط کشت MS:
  • - سترون کردن محیط کشت، ظروف پتری و سایر لوازم:
  • سترون کردن محیط کشت، ظروف پتری و سایر لوازم:
  • برگ جوان وهیپوکوتیل:
  • صفات اندازه گیری شده در دوره کال زایی:
  • محیط جنین زایی:
  • محیط تبدیل به گیاه:
  • فصل چهارم
  • بحث و نتیجه‌گیری
  • فصل چهارم
  • بحث و نتیجه گیری:
  • انتخاب ارقام یونجه:
  • شکل 2 : کاشت بذر های استریل در محیط کشت هورمون دار
  • شکل 3: نمونه از کالوس آبدار و غیر جنین زا
  • شکل 7: نمونه ای از کالوسهای حاصل از کاشت بذر
  • بررسی اثر ارقام در رشد کالوسها:
  • بررسی اثر متقابل سطوح هورمونی مختلف با ریزنمونه در رشد کالوسها:
  • شکل8: تشکیل جنین کروی شکل
  • شکل 10: تشکیل جنین نیزه ای شکل
  • بررسی تأثیر نوع محیطهای کشت در جنین زایی:
  • محیط باززایی:
  • محیط تبدیل به گیاه:
  • شکل 13: شاخه زایی در محیط تبدیل گیاهچه
  • کشت سوسپانسیون:
  • شکل14: نمونه از تولید شاخه و ریشه
  • بحث و نتیجه گیری و پیشنهادات:
  • شکل 15: نمونه ای از کشت سوسپانسیون
  • شکل17: جوانه زنی جنین در محیط سوسپانسیون
  • شکل 18: ایجاد شاخه در محیط کشت سوسپانسیون
  • شکل 18: نمونه ای از مراحل تکاملی جنین در محیط سوسپانسیون
  • منابع:



فصل اول
مقدمه:
روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی گیاه کامل و از طریق تولید جنسی است. در سالهای اخیر روشی برای دستکاری ژنتیکی در سطح سلولی پیدا شده است که روشهای اصلاحی را بطور منحصر بفرد کامل می کند. موجودیت پیدا کردن روشهای کشت بافت و سلول را می توان به پیشرفتهای ناشی از دانش کشت سلولی و زیست شناسی مولکولی دانست (4 و 51)
بیوتکنولوژی یا فناوری زیستی مجموعه ای از فنون را تشکیل می دهد که امکان بکارگیری، توانایی و کارآیی سلولهای موجودات زنده اعم از حیوانی یا گیاهی را فراهم می سازد. در سالهای اخیر با انجام تحقیقات متعدد در حوزة بیوتکنولوژی کشاورزی این بخش دارای جایگاه مهم و باارزشی شده است و این امکان را در رابطه با گیاهان زراعی فراهم نموده است که بسیار مطالب کارآتر از روشهای کلاسیک اصلاح نباتات با استفاده از تکنیکهای مختلف از قبیل دست ورزی ژنتیکی (Genetic manipulation)، کشت بافت و سلول گیاهی در شرایط In Vitro و غیره، گیاهانی با سازگاری متناسب تر و بیشتر به شرایط محیطی و همچنین سازگار با نیاز انسانها تولید نماید.
تکنیک کشت بافت و سلول گیاهی در شرایط In Vitro ازجمله فنون بیوتکنولوژی است که کاربرد آن به اوایل سالهای 1950 می رسد. بر اساس این تکنیک، سلول گیاهی یا بافت از اندامهایی مثل ریشه، ساقه، برگ و گل آذین یا هر اندام دیگری از گیاه جدا شده و در شرایط کاملاً استریل و گندزدایی شده، در درون لوله های آزمایش محتوی محیط غذایی مصنوعی قرار گرفته و با تأمین نیازهای نوری و حرارتی مناسب تبدیل به یک گیاه کامل می گردد. این تکنیک همانطور که اشاره شد امکان تولید هزاران گیاهچه مشابه گیاه مادری را در مدت زمان بسیار کوتاهی و در فضای فیزیکی بسیار محدودی فراهم می‌سازد که با انتقال این گیاهچه ها به سطح گلخانه و مزرعه تولید انبوهی از گیاهان مورد نظر را می توان باعث شد. در اصلاح نباتات با استفاده از تکنیک کشت بافت و نیز تولید کالوس یا گیاهچه ها در مقیاس وسیع و انجام گزینش در بین نمونه ها می توان از ارقام مقاوم به استرسهای محیطی را تولید نمود. فنون فوق فرصتهای مناسبی در بخشهای مختلف تحقیقاتی، اقتصادی بوجود آورده است که با تقویت بخش دولتی و فعال نمودن بخش خصوصی کارایی این بخشها را برای تأمین و تولید محصولات اساسی کشور را، بطور قابل ملاحظه ای می توان افزایش داد. (51 و 98)

تاریخچة اهمیت کشت بافت:
مفهوم کشت بافت گیاهی خلاصة عبارت کشت پروتوپلاست گیاهی، سلول گیاهی، بافت و کشت اندام گیاهی است. کشت بافت و سلول گیاهی بر اساس نظریة شوان مبنی بر دارا بودن خاصیت توتی پوتنسی سلولها پایه گذاری شد. توتی پوتنسی خاصیتی است که بر اساس آن یک سلول دارای توان تبدیل شدن به موجود کامل است. در سالهای اخیر، تکنیک کشت بافت گیاهی به یک ابزار بسیار قدرتمند برای تکثیر و اصلاح بسیاری از گونه های گیاهی تبدیل گشته است. این تکنیک با ابراز نظریة گوتلیب هابرلاندت در مورد خاصیت توتی‌پوتنسی در سلول گیاهی در آغاز قرن بیستم آغاز گردید. هارلاند پیشنهاد نمود که روشهای جداسازی و کشت اندام گیاهی باید توسعه یابد و ادعا نمود که اگر محیط و مواد غذایی سلولهای کشت شده، دستورزی شده باشند، آن سلولها باید صفات ارثی مربوط به مراحل رشد و نموی گیاه اولیه را تکرار نمایمد. دیدگاه هابرلاند در حقیقت قابل توجه بود زیرا وی حتی بیان داشت که خارج از سلولهای سوماتیکی زنده، جنینهای مصنوعی به صورت غیر جنسی رشد و نمو می یابند.(5) احتمالاً وایت نخستین کسی بود در سال 1954 مسئله کشت سلولی را به روشنی بیان کرد. او بیان داشت که تفاوتهای بین سلولهای دیگر در آن ارگانیسم می باشد. لذا امکان دارد بتوان با جدا نمودن سلول، پتانسیل نهفته توتی پوتنت را به آنها بازگردانید. البته احتمال دارد که این خاصیت در سلول برای همیشه از دست رفته باشد. اسکوگ و میلر در 1957 پیشنهاد نمودند که اثرات متقابل کمی بین اکسین و سیتوکینین نوع رشد و مراحل مورفولوژیک را که باید در گیاه رخ دهد، تعیین می کنند. مطالعات آنها در توتون نشان داد که نسبت بالای اکسین به سیتوکسین باعث القای رشد ریشه می شود؛ درحالیکه نسبت بالای سیتوکسین به اکسین باعث القای رشد ساقه میگردد، هرچند که این الگو پاسخ کلی و عمومی نیست. (1 و 5 و 9 و 98)
دستورزی نسبت اکسین به سیتوکینین در بسیاری از گونه ها و جنسها برای ریخت زایی موفقیت آمیز بوده است. کارهایی که توسط مورل (1960) روی ازدیاد ارکیده انجام گردیده است، آغازی برای کاربرد تکنیک کشت بافت گیاهی برای تکثیر و اصلاح بسیاری از گونه های گیاهی بود که منجر به توسعه و گسترش استفاده از محیطهای کشت جدید با غلظتهای بالای نمک توسط موراشیگ و اسکوک گردید.
در سال 1966 نیز گوها و محشوری امکان ایجاد تعداد زیادی از گیاهچه هاپلوئید از دانه داتوره بوسیله کشت بساکهای نابالغ را ثابت کردند. (98)
در سال 1970 اولین امتزاج موفقیت امیز پروتوپلاست در محیط کشت تحقق یافت. در همین سال انتخاب موتانهای بیوشیمیایی در شرایط آزمایشگاهی صورت گرفت. در 1974 تولید گیاهان هیبرید حاصل از امتزاج پروتوپلاستهای هاپلوئید به نتیجه رسید. (1 و 98)
تحقیقات در زمینه کشت بافت گیاهی از سال 1975 به بعد بطور چشمگیری افزایش یافت و از دهة 1980 به بعد به عنوان بخش مهمی از بیوتکنولوژی گیاهی مورد توجه بسیاری از دانشمندان قرار گرفته است بطوریکه در سال 1977 توسط چلتون و همکاران ادغام موفقیت آمیز DNA پلاسمید Ti از Agrobacteriam tumefaciens به گیاهان صورت گرفت. (98 و 100)
در حال حاضر کشت بافت به عنوان پیش نیاز مهندسی ژنتیک از اهمیت ویژه ای برخوردار است. از طرفی کشت بافت بعنوان مکمل روشهای کلاسیک متداول در اصلاح نباتات بکار می رود نه جایگزین آن (86 و 100)
اساس گیاه شناسی برای کشت بافت:
ظرفیت طبیعی گیاهان به منظور تکثیر توسط فرآیندهای غیرجنسی، اساس تکثیر در تکنیک کشت بافت است. کشت بافت به سادگی به ما کمک می کند تا از پتانسیل طبیعی موجود در گیاه برای رشد و تکثیر استفاده کنیم که البته تکنیکی بسیار کارآمد و قابل پیش بینی است (62 و 96)

اهداف مورد نیاز با استفاده از تکنولوژیهای جدید کشت بافت و مهندسی ژنتیک:
• تکثیر سریع گیاهان جهت استفاده در تحقیقات اصلاحی ژنتیکی.
• تولید گیاهان هاپلوئید و دای هاپلوئید
• ایجاد هیبریداسیون سوماتیکی بین گونه ای و بین جنسی
• ایجاد موتاسیونهای القایی
• حفظ و نگهداری منابع گیاهی از طریق کشت بافت
• انتقال ژنهای خارجی مطلوب به سلولهای مورد نیاز از طریق کشت بافت و مهندسی ژنتیک
• تولید گیاهان عاری از ویروس
• ایجاد لاینهای مقاوم به امراض و بیماریها
• ایجاد لاینهای مقاوم به شوری و خشکی
• تهیه لاینهای مقاوم به علف کشها


دانلود با لینک مستقیم


روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی

عنوان تحقیق: بررسی تاثیر عدم ­تقارن اطلاعاتی بر روی دستکاری اقلام تعهدی اختیاری و فعالیت­ های واقعی

اختصاصی از حامی فایل عنوان تحقیق: بررسی تاثیر عدم ­تقارن اطلاعاتی بر روی دستکاری اقلام تعهدی اختیاری و فعالیت­ های واقعی دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

عنوان تحقیق: بررسی تاثیر عدم ­تقارن اطلاعاتی بر روی دستکاری اقلام تعهدی اختیاری و فعالیت­ های واقعی


عنوان تحقیق: بررسی تاثیر عدم ­تقارن اطلاعاتی بر روی دستکاری اقلام تعهدی اختیاری و فعالیت­ های واقعی

 

بررسی تاثیر عدم ­تقارن اطلاعاتی بر روی دستکاری اقلام تعهدی اختیاری و فعالیت­ های واقعی

146 صفحه

چکیده:

وقتی عدم­تقارن اطلاعاتی زیاد است، سهام­داران منابع کافی یا اطلاعات مربوط برای کنترل فعالیت های مدیریت را در دسترس ندارند که باعث اجرای مدیریت سود می­ شود. لذا در این تحقیق، تاثیر عدم ­تقارن اطلاعاتی را بر روی مدیریت سود در شرکت­ های پذیرفته شده در بورس اوراق بهادار تهران  طی سال­های 1384 الی 1389 مورد بررسی قرار داده ­ایم. دستکاری اقلام تعهدی اختیاری و فعالیت ­های واقعی به عنوان محرک­ ها و ابزارهای مدیریت سود در نظر گرفته شده است. در این راستا ابتدا وجود دستکاری اقلام تعهدی اختیاری به وسیله مدل کاسزنیک (1999) و دستکاری فعالیت ­های واقعی که خود از طریق جریان غیرنرمال، تولید غیرنرمال و هزینه ­های اختیاری انجام می پذیرد، به وسیله­ ی مدل روچودهری(2006) اندازه ­گیری شده است.  روش آماری مورد استفاده جهت آزمون فرضیه­ های مطرح شده در پژوهش رگرسیون چند متغیره می­ باشد. یافته ­های تحقیق نشان می­ دهد که بین عدم­ تقارن اطلاعاتی و محرک ­های مدیریت سود یک رابطه مثبت و معناداری وجود دارد، بدین صورت که، در شرایطی که عدم ­تقارن اطلاعاتی وجود دارد مدیران به صورت جسورانه ­تری به مدیریت سود می­ پردازند ولی میزان استفاده از این ابزارها در سطح ­های مختلف از عدم ­تقارن اطلاعاتی فرق می­ کند. بدین صورت که در سطح پایین از عدم­تقارن اطلاعاتی مدیران بیشتر تمایل به دستکاری جریان ­های نقدی و تولید غیرعادی دارند ولی در صورتی که برای دستکاری اقلام تعهدی اختیاری و هزینه ­های اختیاری در دو سطح عدم ­تقارن اطلاعاتی تفاوتی قائل نیستند.      

واژه ­های کلیدی: عدم ­تقارن اطلاعاتی، مدیریت سود، دستکاری اقلام تعهدی اختیاری، جریان نقدی غیرنرمال، تولید غیرنرمال و هزینه ­های اختیاری


دانلود با لینک مستقیم


عنوان تحقیق: بررسی تاثیر عدم ­تقارن اطلاعاتی بر روی دستکاری اقلام تعهدی اختیاری و فعالیت­ های واقعی

تأثیریک برنامه منتخب دستکاری برادراک حس حرکت کودکان 6-4 ساله-- دو فصل اول 69 ص

اختصاصی از حامی فایل تأثیریک برنامه منتخب دستکاری برادراک حس حرکت کودکان 6-4 ساله-- دو فصل اول 69 ص دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

تأثیریک برنامه منتخب دستکاری برادراک حس حرکت کودکان 6-4 ساله-- دو فصل اول 69 ص


تأثیریک برنامه منتخب دستکاری برادراک حس حرکت کودکان 6-4 ساله-- دو فصل اول 69 ص

 

1-1: مقدمه

یکی از خصوصیات انسان حرکت است که این حرکت برای توانایی فرد در گذران زندگی و جابجایی به منظور انجام امور روزمره مانند کار، بازی و  ورزش است . انجام حرکت به عنوان پایه ای برای مهارت های تخصصی و ورزش  محسوب می شود که عدم درک صحیح از حرکت ویا نقصان در انجام یا ادراک آن می تواند بر کارایی واجرای فرد در مهارت های زندگی و ورزش اثرسوء بگذارد.

 در هر حرکتی ادراک حس حرکت ودر آگاهی فردنسبت به وضعیت بدن ومحیط اطراف نقش مهم و موثری را ایفا می کند و نیز از آنجا که این حس نیز مانند سایر حواس انسان در اثر استفاده مناسب تقویت و در اثر عدم استفاده ی بهینه رو به ضعف می گذارد بر آنیم تا حس حرکت را در کودکان  مورد ارزیابی قرار دهیم. در این راستا نیز ادراک حس حرکت نقش بسیار مهمی در انجام موفق حرکات  به خصوص تکنیک ها و فعالیت های ورزشی دارد.

اگر به واقع کودکان نسبت به محرومیت از فعالیت های حرکتی حساس هستند، لازم است تجارب حرکتی مورد نیاز را برای بهینه کردن رشد کسب کنند.این عامل به کودکان امکان می دهد که در اثر تمرین به مهارت های لازم در اجرای حرکات ورزشی برسند ونیز این فعالیت ها کودک را در معرض تجربه  گسترده ای قرار می دهد و به او این امکان را می دهد که فعالیت های ادراکی حرکتی را برسی و تمرین کند. در نتیجه کودکان به تدریج بر محیط فیزیکی پیرامون خود مسلط و بطور فزاینده ای بر توانایی های خود اعتماد می کند.

 برخی از این فعالیت ها شامل برنامه های مربوط به رشد سیستم ادراکی حرکتی است که بعضی از آنها به یکپارچگی حواس نیاز دارد.بازی ،حرکت و دستکاری اشیاء فرایند آموزشی است که کودک با میل و رغبت به آن پرداخته و از آن لذت می برد.پیاژه می گوید بازی علاوه بر تاثیزی که بر رشد مهارت های حرکتی دارد، بر رشد عاطفی و شناختی کودک نیز موثراست.

 

1-2: بیان مسئله

اولین و بهترین دوران زندگی انسان کودکی است. شش سال اول زندگی، مرحله ای حساس در             شکل گیری شخصیت، رشد هوش وتعامل اجتماعی کودک را تشکیل می دهد. در این دوره کودک برای اولین بار با طبیعت اطراف خود رابطه برقرار می کند و مفهومی از خود را می شناسد.

برای صاحب نظران فلسفه، تعلیم و تربیت، روانشناسان، فیزیولوژیستها، جامعه شناسان و متخصصین تربیت بدنی آموزش در دوران اولیه کودکی مورد توجه و علاقه بوده است(هی وود،1980).

 در این خصوص انسان ها می توانند اطلاعات وحس حرکت را مانند سایر حواس از اوایل زندگی پردازش کنند.لیکن پیشرفت ادراک حرکتی در طول دوران کودکی ادامه می یابد.

اگر چشم خود را ببندیم می توانیم با دست خودگوش  یا بینی یا عضو دیگری از بدن را لمس کنیم. بدون اینکه مدتی دست ما در جستجوی آن عضو باشد و پیوسته از وضع بدن خود آگاهیم. مثلاً می دانیم کدام پای را جلو گذاشته ایم و کدام را عقب و می توانیم با دست اشیاء را بلند کنیم و سبکی و سنگینی آنان را درک کنیم . در اطاق تاریکی می توانیم به طرف کلید چراغ برویم و آن را روشن کنیم اگر اتومبیل رانی بدانیم می توانیم بدون تمرکز درباره حرکات مختلف به راندن اتومبیل مشغول باشیم و به چیز های دیگر فکر کنیم ویا برخی حرکات ورزشی را خود بخود انجام می دهیم. آنچه ما را قادر به انجام این کارها می کند حس حرکت است که در عضلات و وتر ها و مفاصل قرار دارند.وقتی عضلات یا وتر ها یا مفاصل، حرکت می کنند استیمولوس با تحریک گیرنده های حس حرکت کم و زیادمی شود و در نتیجه جریانهای عصبی به مغز فرستاده می شود و مغز را از وضع و حالت عضله و مفصل و غیره آگاه می کند. از مغز نیز پیام هایی به سوی عضلات ووتر ها و مفاصل ارسال می شود. در اثر رفت و برگشت این جریان عصبی فعالیت های حرکتی تسهیل و فعالیت های حرکتی بصورت ناخود آگاه انجام می شود.

یکی از جنبه های حس حرکت ادراک حسی است که شامل موضع یابی لمسی، نقاط چند گانه لمسی، ادراک اشیاء، ادراک بدن (آگاهی جسمی)، ادراک حرکت اندام ها، جهت یابی فضایی و ادراک جهت   می باشد.

مطالعات گذشته اطلاعاتی را در مورد پیشرفت حس حرکت در جنبه ها و سنین مختلف کودک ارائه کرده است.اکثر مطالعات نشان داده اند که پیشرفت جنبه های ادراکی حرکتی در سنین 8 - 4 سالگی رخ می دهد.

به عنوان مثال تمپل (1970) تحقیقی در مورد موضع یابی لمسی انجام داد و به این نتیجه رسید که کودکان 4 ساله در مورد لمس دستها و ساعد نسبت به کودکان 6 و8 ساله دقت کمتری دارند.


دانلود با لینک مستقیم


تأثیریک برنامه منتخب دستکاری برادراک حس حرکت کودکان 6-4 ساله-- دو فصل اول 69 ص

مقاله روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی

اختصاصی از حامی فایل مقاله روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

مقاله روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی


مقاله روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی

 

 

 

 

 

 

 


فرمت فایل : WORD (قابل ویرایش)

تعداد صفحات:110

فهرست مطالب:

فصل اول
مقدمه:
تاریخچة اهمیت کشت بافت:
اساس گیاه شناسی برای کشت بافت:
اهداف مورد نیاز با استفاده از تکنولوژیهای جدید کشت بافت و مهندسی ژنتیک:
فصل دوم
تاریخچه:
اهمیت اقتصادی:
گیاهشناسی یونجه:
آب و هوا:
کاربرد بیوتکنولوژی در اصلاح یونجه:
مهندسی ژنتیک:
فصل سوم
کشت بافت
فصل سوم
بررسی منابع:
کشت بافت یونجه:
4- باززایی
3-3- اثرات زمینه ژرم پلاسم در باززائی:
انواع کشت بافت گیاهی:
کشت سوسپانسیون:
مراحل رشد کشت سلولی:
بذر مصنوعی یونجه و کاربرد آن:
کاربرد بیوتکنولوژی:
پتانسیل بذور مصنوعی:
کاربرد بذر مصنوعی:
امکانات مورد نیاز برای کشت بافت و سلول گیاهی:
مواد و روشها:
انتخاب ارقام یونجه:
روش تهیه محیط کشت MS:
- سترون کردن محیط کشت، ظروف پتری و سایر لوازم:
سترون کردن محیط کشت، ظروف پتری و سایر لوازم:
برگ جوان وهیپوکوتیل:
صفات اندازه گیری شده در دوره کال زایی:
محیط جنین زایی:
محیط تبدیل به گیاه:
فصل چهارم
بحث و نتیجه‌گیری
فصل چهارم
بحث و نتیجه گیری:
انتخاب ارقام یونجه:
شکل 2 : کاشت بذر های استریل در محیط کشت هورمون دار
شکل 3:  نمونه از کالوس آبدار و غیر جنین زا
شکل 7: نمونه ای از کالوسهای حاصل از کاشت بذر
بررسی اثر ارقام در رشد کالوسها:
بررسی اثر متقابل سطوح هورمونی مختلف با ریزنمونه در رشد کالوسها:
شکل8:  تشکیل جنین کروی شکل
شکل 10: تشکیل جنین نیزه ای شکل
بررسی تأثیر نوع محیطهای کشت در جنین زایی:
محیط باززایی:
محیط تبدیل به گیاه:
شکل 13: شاخه زایی در محیط تبدیل گیاهچه
کشت سوسپانسیون:
شکل14: نمونه از تولید شاخه و ریشه
بحث و نتیجه گیری و پیشنهادات:
شکل 15: نمونه ای از  کشت سوسپانسیون
شکل17: جوانه زنی جنین در محیط سوسپانسیون
شکل 18: ایجاد شاخه در محیط کشت سوسپانسیون
شکل 18: نمونه ای از مراحل تکاملی جنین در محیط سوسپانسیون
منابع:

 

 

فصل اول
مقدمه:
روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی گیاه کامل و از طریق تولید جنسی است. در سالهای اخیر روشی برای دستکاری ژنتیکی در سطح سلولی پیدا شده است که روشهای اصلاحی را بطور منحصر بفرد کامل می کند. موجودیت پیدا کردن روشهای کشت بافت و سلول را می توان به پیشرفتهای ناشی از دانش کشت سلولی و زیست شناسی مولکولی دانست (4 و 51)
بیوتکنولوژی یا فناوری زیستی مجموعه ای از فنون را تشکیل می دهد که امکان بکارگیری، توانایی و کارآیی سلولهای موجودات زنده اعم از حیوانی یا گیاهی را فراهم می سازد. در سالهای اخیر با انجام تحقیقات متعدد در حوزة بیوتکنولوژی کشاورزی این بخش دارای جایگاه مهم و باارزشی شده است و این امکان را در رابطه با گیاهان زراعی فراهم نموده است که بسیار مطالب کارآتر از روشهای کلاسیک اصلاح نباتات با استفاده از تکنیکهای مختلف از قبیل دست ورزی ژنتیکی (Genetic manipulation)، کشت بافت و سلول گیاهی در شرایط In Vitro و غیره، گیاهانی با سازگاری متناسب تر و بیشتر به شرایط محیطی و همچنین سازگار با نیاز انسانها تولید نماید.
تکنیک کشت بافت و سلول گیاهی در شرایط In Vitro ازجمله فنون بیوتکنولوژی است که کاربرد آن به اوایل سالهای 1950 می رسد. بر اساس این تکنیک، سلول گیاهی یا بافت از اندامهایی مثل ریشه، ساقه، برگ و گل آذین یا هر اندام دیگری از گیاه جدا شده و در شرایط کاملاً استریل و گندزدایی شده، در درون لوله های آزمایش محتوی محیط غذایی مصنوعی قرار گرفته و با تأمین نیازهای نوری و حرارتی مناسب تبدیل به یک گیاه کامل می گردد. این تکنیک همانطور که اشاره شد امکان تولید هزاران گیاهچه مشابه گیاه مادری را در مدت زمان بسیار کوتاهی و در فضای فیزیکی بسیار محدودی فراهم می‌سازد که با انتقال این گیاهچه ها به سطح گلخانه و مزرعه تولید انبوهی از گیاهان مورد نظر را می توان باعث شد. در اصلاح نباتات با استفاده از تکنیک کشت بافت و نیز تولید کالوس یا گیاهچه ها در مقیاس وسیع و انجام گزینش در بین نمونه ها می توان از ارقام مقاوم به استرسهای محیطی را تولید نمود. فنون فوق فرصتهای مناسبی در بخشهای مختلف تحقیقاتی، اقتصادی بوجود آورده است که با تقویت بخش دولتی و فعال نمودن بخش خصوصی کارایی این بخشها را برای تأمین و تولید محصولات اساسی کشور را، بطور قابل ملاحظه ای می توان افزایش داد. (51 و 98)

تاریخچة اهمیت کشت بافت:
مفهوم کشت بافت گیاهی خلاصة عبارت کشت پروتوپلاست گیاهی، سلول گیاهی، بافت و کشت اندام گیاهی است. کشت بافت و سلول گیاهی بر اساس نظریة شوان مبنی بر دارا بودن خاصیت توتی پوتنسی سلولها پایه گذاری شد. توتی پوتنسی خاصیتی است که بر اساس آن یک سلول دارای توان تبدیل شدن به موجود کامل است. در سالهای اخیر، تکنیک کشت بافت گیاهی به یک ابزار بسیار قدرتمند برای تکثیر و اصلاح بسیاری از گونه های گیاهی تبدیل گشته است. این تکنیک با ابراز نظریة گوتلیب هابرلاندت در مورد خاصیت توتی‌پوتنسی در سلول گیاهی در آغاز قرن بیستم آغاز گردید. هارلاند پیشنهاد نمود که روشهای جداسازی و کشت اندام گیاهی باید توسعه یابد و ادعا نمود که اگر محیط و مواد غذایی سلولهای کشت شده، دستورزی شده باشند، آن سلولها باید صفات ارثی مربوط به مراحل رشد و نموی گیاه اولیه را تکرار نمایمد. دیدگاه هابرلاند در حقیقت قابل توجه بود زیرا وی حتی بیان داشت که خارج از سلولهای سوماتیکی زنده، جنینهای مصنوعی به صورت غیر جنسی رشد و نمو می یابند.(5) احتمالاً وایت نخستین کسی بود در سال 1954 مسئله کشت سلولی را به روشنی بیان کرد. او بیان داشت که تفاوتهای بین سلولهای دیگر در آن ارگانیسم می باشد. لذا امکان دارد بتوان با جدا نمودن سلول، پتانسیل نهفته توتی پوتنت را به آنها بازگردانید. البته احتمال دارد که این خاصیت در سلول برای همیشه از دست رفته باشد. اسکوگ و میلر در 1957 پیشنهاد نمودند که اثرات متقابل کمی بین اکسین و سیتوکینین نوع رشد و مراحل مورفولوژیک را که باید در گیاه رخ دهد، تعیین می کنند. مطالعات آنها در توتون نشان داد که نسبت بالای اکسین به سیتوکسین باعث القای رشد ریشه می شود؛ درحالیکه نسبت بالای سیتوکسین به اکسین باعث القای رشد ساقه میگردد، هرچند که این الگو پاسخ کلی و عمومی نیست. (1 و 5 و 9 و 98)
دستورزی نسبت اکسین به سیتوکینین در بسیاری از گونه ها و جنسها برای ریخت زایی موفقیت آمیز بوده است. کارهایی که توسط مورل  (1960) روی ازدیاد ارکیده انجام گردیده است، آغازی برای کاربرد تکنیک کشت بافت گیاهی برای تکثیر و اصلاح بسیاری از گونه های گیاهی بود که منجر به توسعه و گسترش استفاده از محیطهای کشت جدید با غلظتهای بالای نمک توسط موراشیگ و اسکوک  گردید.
در سال 1966 نیز گوها  و محشوری  امکان ایجاد تعداد زیادی از گیاهچه هاپلوئید از دانه داتوره بوسیله کشت بساکهای نابالغ را ثابت کردند. (98)
در سال 1970 اولین امتزاج موفقیت امیز پروتوپلاست در محیط کشت تحقق یافت. در همین سال انتخاب موتانهای بیوشیمیایی در شرایط آزمایشگاهی صورت گرفت. در 1974 تولید گیاهان هیبرید حاصل از امتزاج پروتوپلاستهای هاپلوئید به نتیجه رسید. (1 و 98)
تحقیقات در زمینه کشت بافت گیاهی از سال 1975 به بعد بطور چشمگیری افزایش یافت و از دهة 1980 به بعد به عنوان بخش مهمی از بیوتکنولوژی گیاهی مورد توجه بسیاری از دانشمندان قرار گرفته است بطوریکه در سال 1977 توسط چلتون و همکاران ادغام موفقیت آمیز DNA پلاسمید Ti از Agrobacteriam tumefaciens به گیاهان صورت گرفت. (98 و 100)
در حال حاضر کشت بافت به عنوان پیش نیاز مهندسی ژنتیک از اهمیت ویژه ای برخوردار است. از طرفی کشت بافت بعنوان مکمل روشهای کلاسیک متداول در اصلاح نباتات بکار می رود نه جایگزین آن (86 و 100)
اساس گیاه شناسی برای کشت بافت:
ظرفیت طبیعی گیاهان به منظور تکثیر توسط فرآیندهای غیرجنسی، اساس تکثیر در تکنیک کشت بافت است. کشت بافت به سادگی به ما کمک می کند تا از پتانسیل طبیعی موجود در گیاه برای رشد و تکثیر استفاده کنیم که البته تکنیکی بسیار کارآمد و قابل پیش بینی است (62 و 96)

اهداف مورد نیاز با استفاده از تکنولوژیهای جدید کشت بافت و مهندسی ژنتیک:
•    تکثیر سریع گیاهان جهت استفاده در تحقیقات اصلاحی ژنتیکی.
•    تولید گیاهان هاپلوئید و دای هاپلوئید
•    ایجاد هیبریداسیون سوماتیکی بین گونه ای و بین جنسی
•    ایجاد موتاسیونهای القایی
•    حفظ و نگهداری منابع گیاهی از طریق کشت بافت
•    انتقال ژنهای خارجی مطلوب به سلولهای مورد نیاز از طریق کشت بافت و مهندسی ژنتیک
•    تولید گیاهان عاری از ویروس
•    ایجاد لاینهای مقاوم به امراض و بیماریها
•    ایجاد لاینهای مقاوم به شوری و خشکی
•    تهیه لاینهای مقاوم به علف کشها
 

 


دانلود با لینک مستقیم