حامی فایل

مرجع دانلود فایل ,تحقیق , پروژه , پایان نامه , فایل فلش گوشی

حامی فایل

مرجع دانلود فایل ,تحقیق , پروژه , پایان نامه , فایل فلش گوشی

اصلاح نباتات (پایان نامه کارشناسی ارشد رشته کشاورزی) 107 صفحه

اختصاصی از حامی فایل اصلاح نباتات (پایان نامه کارشناسی ارشد رشته کشاورزی) 107 صفحه دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

اصلاح نباتات (پایان نامه کارشناسی ارشد رشته کشاورزی) 107 صفحه


اصلاح نباتات (پایان نامه کارشناسی ارشد رشته کشاورزی) 107 صفحه

مطالب این پست : دانلود پایان نامه               عنوان پایان نامه   : بررسی امکان تولید گیاهان هاپلوئید از طریق کشت میکروسپور در گیاه کلزا

درباره اصلاح نباتات (پایان نامه کارشناسی ارشد) 107 صفحه

  با فرمت ورد (دانلود متن کامل پایان نامه)

 

 

پایان نامه کارشناسی ارشد رشته مهندسی کشاورزی-اصلاح نباتات(M.Sc.)    

 

موضوع:

 

بررسی امکان تولید گیاهان هاپلوئید از طریق کشت میکروسپور در گیاه کلزا

 

 

استادان راهنما:

 

                                         دکتر محمد رضا اردکانی                         دکتر عزت الله فرشادفر

 

استاد مشاور:

 

مهندس بهنام ناصریان خیابانی

مطالب                                      

عنوان                                                                                                              صفحه

                                                           فصل اول: مقدمه

مقدمه ———————————————————— 2

                                              فصل دوم: بررسی منابع                                   

10 کلزا————————————————————

2-1- خصوصیات کلی وعمومی کلزا————————————- 10  

2-1-1- تاریخچه ومبدا ژنتیکی گیاه کلزا———————————– 10

2-1-2- خصوصیات گیاه شناسی کلزا————————————-  10

2-1-3- کشت و تولید کلزا——————————————–  11

2-1-4- برداشت کلزا———————————————–   13

2-1-5- ارقام وگونه های کلزا——————————————   14

2-1-6- مهمترین گونه های جنس براسیکا———————————-   16

2-1-7- اهمیت اقتصادی وصنغتی کلزا————————————-   17

2-2- اصلاح گیاه کلزا————————————————   18

2-2-1- روشهای اصلاح کلزا——————————————-   18

2-2-2- اهداف اصلاحی کلزا——————————————-   19

2-3- گیاهان هاپلوئید————————————————- 20

2-3-1- مزایا و کاربردهای هاپلوئیدها————————————– 21

2-3-2- مشکلات ومحدودیت های هاپلوئیدها——————————– 22

2-3-3- روشهای تولید گیاهان هاپلوئید————————————- 23

2-3-3-1- تولید خود به خودی (روشهای طبیعی)—————————–  23

2-3-3-2- تولید القایی(روشهای آزمایشگاهی)——————————-  24

2-3-3-2-1- آندروژنز(نرزایی)-————————————— 24

2-3-3-2-1-1- کشت بساک——————————————- 25

2-3-3-2-1-2- کشت میکروسپور————————————— 25

2-3-3-2-2- ژینوژنز(کشت تخمدان وتخمک)——————————- 26

2-3-3-2-3- روش حذف کروموزومی————————————- 27

2-4- کشت میکروسپورهای جدا گردیده کلزا——————————— 28

2-5- عوامل موثر بر رویانزایی میکروسپورهای جدا گردیده کلزا——————— 29

2-5-1- شرایط رشد، فیزیولوژی و ژنوتیپ گیاه مادری————————— 29

2-5-2- اندازه غنچه————————————————– 32

2-5-3- مراحل تکاملی میکروسپورها————————————– 33

2-5-4- تراکم میکروسپور در محیط کشت———————————– 35

2-5-5- ترکیب محیط کشت——————————————– 36

2-5-6- دما——————————————————- 40

2-6- مکانیسم رویانزایی———————————————– 43

2-6-1- مقدمه—————————————————– 43

2-6-2- تقسیم قرینه هسته والقائ رویانزایی——————————— 45

2-6-3- حوادث چرخه سلولی در طی رویانزایی میکروسپورها——————— 47 2-6-4- خانواده های ژنی درگیر با رویانزایی میکروسپورها در کلزا—————– 47

2-7- عوامل موثر بر باززایی گیاه از رویانهای هاپلوئیدی کلزا———————-  48

2-7-1- بلوغ ،مرحله رشد ونمو رویانها———————————— 48

2-7-2- اندازه رویانها————————————— ——— 49  

2-7-3- محیط کشت———————————————— 50

2-7-5- BAP وژیبرلیک اسید——————————————- 50

2-7-6- استفاده از کاغذ فیلتر در محیط کشت یا زراعی————————- 51

2-7-7- زغال فعال————————————————– 51

2-7-8- تیمار ABA و ابگیری رویانها————————————- 51

2-8- موارد استفاده از کشت میکروسپورکلزا——————————– 56

2-8-1- اصلاح نباتات و مهندسی ژنتیک———————————– 56

2-8-2- موتا سیون و انتخاب —————————————— 56

2-8-3- کشت میکروسپوروتکنولوژی بذر مصنوعی————————— 57

2-8-4- سیستم کشت میکروسپور در مطالعات فیزیولوژیکی و بیوشیمیایی————- 57

2-8-5- استفاده در کشت و امتزاج پروتوپلاستها—————————– 57

 

 

                              فصل سوم: مواد و روشها

                                                                                                        

3-1- مواد گیاهی————————————————– 60

3-2- کشت بذور————————————————– 60

3-3- شرایط اتاق رشد———————————————-   60

3-4- مراقبت های زراعی——————————————–   61

3-5- برداشت غنچه ها وتعیین مرحله مناسب میکروسپورها جهت جنین زایی——— 61

3-6- محیط های کشت، ایزولاسیون وباززاییدر کشت میکروسپورهای کلزا———– 62

3-6-1- محیط ایزولاسیون میکروسپورها———————————- 62

3-6-2- محیط کشت میکروسپورها————————————-   62

3-6-3-1- استریل کردن محیط کشت میکروسپورهای کلزا———————   62

3-6-4- محیط کشت باززایی ، جنین های حاصل از کشت میکروسپورهای کلزا——-  63

3-6-5- وسایل مورد نیاز جهت کشت میکروسپورهای کلزا———————   68

3-7- روش انجام آزمایش کشت میکروسپورهای کلزا————————-  69

3-7-1- برداشت غنچه ها——————————————–  69

3-7-2- استریل کردن غنچه ها—————————————– 69

3-7-3- استخراج میکروسپورها—————————————– 69

3-7-4- تعیین تراکم میکروسپورها————————————— 70

3-8- آزمایشات انجام شده——————————————– 71

3-8-1-مطالعه اثرتراکمهای مختلف میکروسپوربرروی جنین زایی میکروسپورهای کلزا—- 71

3-8-2- مطالعه باززایی گیاه در جنین هایی با اندازه های مختلف حاصل از کشت

میکروسپورهای کلزا————————————————- 72

3-8-3- مطالعه اثراستفاده از کاغذ صافی یا کاغذ فیلتردر میزان ریشه زایی ،ارتفاع گیاهچه ها

ودرصد گیاهچه های نرمال——————————————— 73

3-8-4- مطالعه اثر استفاده ازشوک سرمایی بر روی درصد تشکیل گیاهچه های طبیعی– 74

3-8-5- تعین سطح پلوئیدی گیاهچه های باززایی شده————————– 75

3-9- تجزیه و تحلیل داده ها——————————————– 78

 

                               فصل چهارم:نتایج وبحث    

 

4-1- جنین زایی میکروسپورهای کلزا در تراکمهای مختلف میکروسپور در محیط کشت—- 82

4-2- اثراندازه های مختلف جنین برروی صفات باززایی جنین های حاصل ازکشت

میکروسپورهای کلزا————————————————– 84

4-3- اثراستفاده ازکاغذ صافی یا کاغذ فیلتردر میزان ریشه زایی ،ارتفاع گیاهچه ها

ودرصد گیاهچه های نرمال——————————————— 90

4-4- اثر استفاده ازشوک سرمایی بر روی درصد تشکیل گیاهچه های طبیعی———- 97

4-5- پیشنهادات————————————————— 105

منابع مورد استفاده————————————————– 107

 

3- 1- مواد گیاهی

 

  ارقام مورد استفاده در این آزمایش2 رقم گلوبال وآپشن از تیپهای بهاره ودوصفر می باشند و در چند سال اخیر کشت آنها در ایران رایج شده است.

 

3- 2- کشت بذور

 

       بذور کلزا در داخل گلدانهایی با قطر cm25 کشت گردیدند. خاک مورد استفاده شامل دو قسمت خاک معمولی، یک قسمت خاک برگ، یک قسمت کود دامی، یک قسمت ماسه بود. در داخل هر گلدان 5 الی 6 بذر در قسمتهای مختلف گلدان کشت گردید و گلدانها پس از کشت بذور در داخل اتاقک رشد گروه اصلاح نباتات سازمان انرژی اتمی بخش کشاورزی هسته ای قرار گرفتند. دو هفته پس از سبز شدن بذور و اطمینان از رشد گیاهچه‌ها، در هر گلدان 2 بوته حفظ گردیده و بقیه حذف شدند.

 

3- 3- شرایط اتاق رشدin vivo

 

     نور اتاق رشدی که گلدانها در آن قرار داشتند با 6 لامپ 400 وات بخار سدیم تأمین می شد لامپها در ارتفاع 4/1 متری از سطح گلدانها قرار داشتند و شدت نور در اتاق رشد 30000 لوکس بود. از لحاظ فتوپریودی اتاق رشد روی 8/16 ساعت تاریکی و روشنائی و دمای روز و شب°C10/ °C15 تنظیم شده بود.

 

3- 4- مراقبت‌های زراعی

 

     مراقبت‌های زراعی، شامل آبیاری، سم پاشی، محلول پاشی بود. برنامة آبیاری هر سه روز یکبار انجام گرفت. از نظر کنترل آفات و بیماریها یکی از آفاتی که به وفور در فیتوترون دیده ‌شد شته بود که جهت دفع آنها از دیازینون 2/1 در هزار و متاسیستوکس 1 در هزار استفاده گردید و برنامة سم پاشی در هر دورة رشد گیاهان 2 مرتبه انجام گرفت. یکی از کارهایی که جهت جلوگیری از شیوع آفات و بیماریها انجام گرفت حذف برگهای زرد و مرده در قسمت تحتانی گیاه بود که در هر هفته یک بار این عمل انجام ‌گرفت.به منظور تقویت گیاهان مادری از کودهای مغذی کامل استفاده گردید که این کود به صورت محلول پاشی هر دو هفته یکبار روی برگ گیاهان اسپری شد.

 

 

متن کامل را می توانید دانلود کنید چون فقط تکه هایی از متن این پایان نامه در این صفحه درج شده است(به طور نمونه)

ولی در فایل دانلودی متن کامل پایان نامه

همراه با تمام ضمائم با فرمت ورد که ویرایش و کپی کردن می باشند

موجود است

 


دانلود با لینک مستقیم


اصلاح نباتات (پایان نامه کارشناسی ارشد رشته کشاورزی) 107 صفحه

مقاله روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی

اختصاصی از حامی فایل مقاله روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

مقاله روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی


مقاله روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی

 

 

 

 

 

 

 


فرمت فایل : WORD (قابل ویرایش)

تعداد صفحات:110

فهرست مطالب:

فصل اول
مقدمه:
تاریخچة اهمیت کشت بافت:
اساس گیاه شناسی برای کشت بافت:
اهداف مورد نیاز با استفاده از تکنولوژیهای جدید کشت بافت و مهندسی ژنتیک:
فصل دوم
تاریخچه:
اهمیت اقتصادی:
گیاهشناسی یونجه:
آب و هوا:
کاربرد بیوتکنولوژی در اصلاح یونجه:
مهندسی ژنتیک:
فصل سوم
کشت بافت
فصل سوم
بررسی منابع:
کشت بافت یونجه:
4- باززایی
3-3- اثرات زمینه ژرم پلاسم در باززائی:
انواع کشت بافت گیاهی:
کشت سوسپانسیون:
مراحل رشد کشت سلولی:
بذر مصنوعی یونجه و کاربرد آن:
کاربرد بیوتکنولوژی:
پتانسیل بذور مصنوعی:
کاربرد بذر مصنوعی:
امکانات مورد نیاز برای کشت بافت و سلول گیاهی:
مواد و روشها:
انتخاب ارقام یونجه:
روش تهیه محیط کشت MS:
- سترون کردن محیط کشت، ظروف پتری و سایر لوازم:
سترون کردن محیط کشت، ظروف پتری و سایر لوازم:
برگ جوان وهیپوکوتیل:
صفات اندازه گیری شده در دوره کال زایی:
محیط جنین زایی:
محیط تبدیل به گیاه:
فصل چهارم
بحث و نتیجه‌گیری
فصل چهارم
بحث و نتیجه گیری:
انتخاب ارقام یونجه:
شکل 2 : کاشت بذر های استریل در محیط کشت هورمون دار
شکل 3:  نمونه از کالوس آبدار و غیر جنین زا
شکل 7: نمونه ای از کالوسهای حاصل از کاشت بذر
بررسی اثر ارقام در رشد کالوسها:
بررسی اثر متقابل سطوح هورمونی مختلف با ریزنمونه در رشد کالوسها:
شکل8:  تشکیل جنین کروی شکل
شکل 10: تشکیل جنین نیزه ای شکل
بررسی تأثیر نوع محیطهای کشت در جنین زایی:
محیط باززایی:
محیط تبدیل به گیاه:
شکل 13: شاخه زایی در محیط تبدیل گیاهچه
کشت سوسپانسیون:
شکل14: نمونه از تولید شاخه و ریشه
بحث و نتیجه گیری و پیشنهادات:
شکل 15: نمونه ای از  کشت سوسپانسیون
شکل17: جوانه زنی جنین در محیط سوسپانسیون
شکل 18: ایجاد شاخه در محیط کشت سوسپانسیون
شکل 18: نمونه ای از مراحل تکاملی جنین در محیط سوسپانسیون
منابع:

 

 

فصل اول
مقدمه:
روشهای سنتی اصلاح نباتات مبتنی بر دستکاری ساختار ژنتیکی گیاه کامل و از طریق تولید جنسی است. در سالهای اخیر روشی برای دستکاری ژنتیکی در سطح سلولی پیدا شده است که روشهای اصلاحی را بطور منحصر بفرد کامل می کند. موجودیت پیدا کردن روشهای کشت بافت و سلول را می توان به پیشرفتهای ناشی از دانش کشت سلولی و زیست شناسی مولکولی دانست (4 و 51)
بیوتکنولوژی یا فناوری زیستی مجموعه ای از فنون را تشکیل می دهد که امکان بکارگیری، توانایی و کارآیی سلولهای موجودات زنده اعم از حیوانی یا گیاهی را فراهم می سازد. در سالهای اخیر با انجام تحقیقات متعدد در حوزة بیوتکنولوژی کشاورزی این بخش دارای جایگاه مهم و باارزشی شده است و این امکان را در رابطه با گیاهان زراعی فراهم نموده است که بسیار مطالب کارآتر از روشهای کلاسیک اصلاح نباتات با استفاده از تکنیکهای مختلف از قبیل دست ورزی ژنتیکی (Genetic manipulation)، کشت بافت و سلول گیاهی در شرایط In Vitro و غیره، گیاهانی با سازگاری متناسب تر و بیشتر به شرایط محیطی و همچنین سازگار با نیاز انسانها تولید نماید.
تکنیک کشت بافت و سلول گیاهی در شرایط In Vitro ازجمله فنون بیوتکنولوژی است که کاربرد آن به اوایل سالهای 1950 می رسد. بر اساس این تکنیک، سلول گیاهی یا بافت از اندامهایی مثل ریشه، ساقه، برگ و گل آذین یا هر اندام دیگری از گیاه جدا شده و در شرایط کاملاً استریل و گندزدایی شده، در درون لوله های آزمایش محتوی محیط غذایی مصنوعی قرار گرفته و با تأمین نیازهای نوری و حرارتی مناسب تبدیل به یک گیاه کامل می گردد. این تکنیک همانطور که اشاره شد امکان تولید هزاران گیاهچه مشابه گیاه مادری را در مدت زمان بسیار کوتاهی و در فضای فیزیکی بسیار محدودی فراهم می‌سازد که با انتقال این گیاهچه ها به سطح گلخانه و مزرعه تولید انبوهی از گیاهان مورد نظر را می توان باعث شد. در اصلاح نباتات با استفاده از تکنیک کشت بافت و نیز تولید کالوس یا گیاهچه ها در مقیاس وسیع و انجام گزینش در بین نمونه ها می توان از ارقام مقاوم به استرسهای محیطی را تولید نمود. فنون فوق فرصتهای مناسبی در بخشهای مختلف تحقیقاتی، اقتصادی بوجود آورده است که با تقویت بخش دولتی و فعال نمودن بخش خصوصی کارایی این بخشها را برای تأمین و تولید محصولات اساسی کشور را، بطور قابل ملاحظه ای می توان افزایش داد. (51 و 98)

تاریخچة اهمیت کشت بافت:
مفهوم کشت بافت گیاهی خلاصة عبارت کشت پروتوپلاست گیاهی، سلول گیاهی، بافت و کشت اندام گیاهی است. کشت بافت و سلول گیاهی بر اساس نظریة شوان مبنی بر دارا بودن خاصیت توتی پوتنسی سلولها پایه گذاری شد. توتی پوتنسی خاصیتی است که بر اساس آن یک سلول دارای توان تبدیل شدن به موجود کامل است. در سالهای اخیر، تکنیک کشت بافت گیاهی به یک ابزار بسیار قدرتمند برای تکثیر و اصلاح بسیاری از گونه های گیاهی تبدیل گشته است. این تکنیک با ابراز نظریة گوتلیب هابرلاندت در مورد خاصیت توتی‌پوتنسی در سلول گیاهی در آغاز قرن بیستم آغاز گردید. هارلاند پیشنهاد نمود که روشهای جداسازی و کشت اندام گیاهی باید توسعه یابد و ادعا نمود که اگر محیط و مواد غذایی سلولهای کشت شده، دستورزی شده باشند، آن سلولها باید صفات ارثی مربوط به مراحل رشد و نموی گیاه اولیه را تکرار نمایمد. دیدگاه هابرلاند در حقیقت قابل توجه بود زیرا وی حتی بیان داشت که خارج از سلولهای سوماتیکی زنده، جنینهای مصنوعی به صورت غیر جنسی رشد و نمو می یابند.(5) احتمالاً وایت نخستین کسی بود در سال 1954 مسئله کشت سلولی را به روشنی بیان کرد. او بیان داشت که تفاوتهای بین سلولهای دیگر در آن ارگانیسم می باشد. لذا امکان دارد بتوان با جدا نمودن سلول، پتانسیل نهفته توتی پوتنت را به آنها بازگردانید. البته احتمال دارد که این خاصیت در سلول برای همیشه از دست رفته باشد. اسکوگ و میلر در 1957 پیشنهاد نمودند که اثرات متقابل کمی بین اکسین و سیتوکینین نوع رشد و مراحل مورفولوژیک را که باید در گیاه رخ دهد، تعیین می کنند. مطالعات آنها در توتون نشان داد که نسبت بالای اکسین به سیتوکسین باعث القای رشد ریشه می شود؛ درحالیکه نسبت بالای سیتوکسین به اکسین باعث القای رشد ساقه میگردد، هرچند که این الگو پاسخ کلی و عمومی نیست. (1 و 5 و 9 و 98)
دستورزی نسبت اکسین به سیتوکینین در بسیاری از گونه ها و جنسها برای ریخت زایی موفقیت آمیز بوده است. کارهایی که توسط مورل  (1960) روی ازدیاد ارکیده انجام گردیده است، آغازی برای کاربرد تکنیک کشت بافت گیاهی برای تکثیر و اصلاح بسیاری از گونه های گیاهی بود که منجر به توسعه و گسترش استفاده از محیطهای کشت جدید با غلظتهای بالای نمک توسط موراشیگ و اسکوک  گردید.
در سال 1966 نیز گوها  و محشوری  امکان ایجاد تعداد زیادی از گیاهچه هاپلوئید از دانه داتوره بوسیله کشت بساکهای نابالغ را ثابت کردند. (98)
در سال 1970 اولین امتزاج موفقیت امیز پروتوپلاست در محیط کشت تحقق یافت. در همین سال انتخاب موتانهای بیوشیمیایی در شرایط آزمایشگاهی صورت گرفت. در 1974 تولید گیاهان هیبرید حاصل از امتزاج پروتوپلاستهای هاپلوئید به نتیجه رسید. (1 و 98)
تحقیقات در زمینه کشت بافت گیاهی از سال 1975 به بعد بطور چشمگیری افزایش یافت و از دهة 1980 به بعد به عنوان بخش مهمی از بیوتکنولوژی گیاهی مورد توجه بسیاری از دانشمندان قرار گرفته است بطوریکه در سال 1977 توسط چلتون و همکاران ادغام موفقیت آمیز DNA پلاسمید Ti از Agrobacteriam tumefaciens به گیاهان صورت گرفت. (98 و 100)
در حال حاضر کشت بافت به عنوان پیش نیاز مهندسی ژنتیک از اهمیت ویژه ای برخوردار است. از طرفی کشت بافت بعنوان مکمل روشهای کلاسیک متداول در اصلاح نباتات بکار می رود نه جایگزین آن (86 و 100)
اساس گیاه شناسی برای کشت بافت:
ظرفیت طبیعی گیاهان به منظور تکثیر توسط فرآیندهای غیرجنسی، اساس تکثیر در تکنیک کشت بافت است. کشت بافت به سادگی به ما کمک می کند تا از پتانسیل طبیعی موجود در گیاه برای رشد و تکثیر استفاده کنیم که البته تکنیکی بسیار کارآمد و قابل پیش بینی است (62 و 96)

اهداف مورد نیاز با استفاده از تکنولوژیهای جدید کشت بافت و مهندسی ژنتیک:
•    تکثیر سریع گیاهان جهت استفاده در تحقیقات اصلاحی ژنتیکی.
•    تولید گیاهان هاپلوئید و دای هاپلوئید
•    ایجاد هیبریداسیون سوماتیکی بین گونه ای و بین جنسی
•    ایجاد موتاسیونهای القایی
•    حفظ و نگهداری منابع گیاهی از طریق کشت بافت
•    انتقال ژنهای خارجی مطلوب به سلولهای مورد نیاز از طریق کشت بافت و مهندسی ژنتیک
•    تولید گیاهان عاری از ویروس
•    ایجاد لاینهای مقاوم به امراض و بیماریها
•    ایجاد لاینهای مقاوم به شوری و خشکی
•    تهیه لاینهای مقاوم به علف کشها
 

 


دانلود با لینک مستقیم