دانلود پایان نامه بررسی عوامل تاثیر زیستی در بروز سوء مصرف مواد

اختصاصی از حامی فایل دانلود پایان نامه بررسی عوامل تاثیر زیستی در بروز سوء مصرف مواد دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

پژوهش حاضر به بررسی عوامل زیستی مؤثر در بروز سوء مصرف مواد پرداخته است. به همین منظور در کنار سؤال اصلی مبنی بر «مقایسه تأثیر عوامل زیستی مؤثر در بروز رفتار سوء مصرف مواد در بین افراد معتاد و غیرمعتاد»، یک سؤال دیگر با توجه به متغیرهای سن، سطح تحصیلات، شغل، وضعیت تأهل در افراد معتاد تهیه و مورد بررسی قرار گرفت.تعداد صفحات:141

روش پژوهش توصیفی از نوع علمی، مقایسه‌ای وجامعه آماری شامل کلیه افراد معتاد مستقر در زندان مرکزی اصفهان در سال 1387 و همچنین دانشجویان به عنوان گروه شاهد بوده است. نمونه پژوهش شامل 60 نفر از معتادین و 60 نفر از افراد عادی بوده که گروه معتادین به روش نمونه‌گیری تصادفی ساده انتخاب شده و گروه غیرمعتاد به وسیله روش نمونه گیری تصادفی خوشه ای انتخاب شده است. ابزار اندازه‌گیری پرسش‌نامه 60 سؤالی‌ گری و ویلسون بوده است که از روایی و پایایی مناسبی در تحقیقات قبلی برخوردار بوده است. داده‌ها با استفاده از روش‌های آزمون T و آزمون F مورد بررسی قرار گرفت که عمده‌ترین نتایج آن به شرح زیر می‌باشد:

- تفاوت معناداری بین عوامل زیستی گرایش به سوءمصرف مواد در افراد معتاد و غیرمعتاد وجود دارد.

- بین عوامل مؤثر بر سوءمصرف مواد مخدر در افراد معتاد و غیرمعتاد بر اساس متغیرهای سن، سطح تحصیلات، شغل، وضعیت تأهل تفاوت معناداری وجود داشت.

غنی سازی گاز Co2 و تأثیرات آن بر روی فرآیندهای زیستی گیاه

اختصاصی از حامی فایل غنی سازی گاز Co2 و تأثیرات آن بر روی فرآیندهای زیستی گیاه دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

مقدمه :

امروزه بحث نیازغذائی دررأس مباحث علمی وکشاورزی قرارگرفته ومقبولترین روش جهت مقابله بااین بحران افزایش عملکردگیاهان زراعی درواحدسطح است . این مهم تحقق نمی یابدمگرباشناخت عوامل محدودکننده افزایش عملکردگیاهان زراعی.                                  

ازجمله عوامل محدودکننده عملکرددرتعدادی ازگیاهان غلظت ₂CO دراتمسفراست          

تاریخچه شناخت گاز₂CO واستفاده از ان به عنوان یک ماده غذائی به اوایل قرن 17 برمیگردد ودانشمندی به نام هلمونت آزمایشی به این ترتیب انجام داد.که یک درخت بید به وزن 2/2 کیلوگرم را در داخل یک گلدان که حاوی 8/90 کیلوگرم خاک خشک شده درآون بودکاشت وباآب باران درمواقع لزوم گلدان راآب می داد.بعدازپنج سال وزن درخت بیدبه حدود7/76 کیلوگرم رسید. درصورتی که وزن خاک گلدان حدود3/90 گیلوگرم بود.مهمترین نتیجه این آزمایش این بودکه ماده اولیه ای که سبب رشدگیاهان می گرددواندامهای مختلف گیاهی دراثرآن رشدونمکووتکامل می یابند₂COموجود در اتمسفرمی باشد.   

اثرافزایشی گاز₂CO برروی فرایندهای زیستی گیاه ناگفته نماندکه مهمترین واساسی ترین نقش این افزایش متوجه فتوسنتزمی شود.                

فرایندهای درگیرجهت جذب₂CO به شرح زیربیان می شود.                                          

قرارگرفتن گیاه درغلظتهای بالاترازمیزان غلظت اتمسفرمحیط ضمن تأثیربرروی فرایندهای آنزیمی ومتابولیکی ممکن است موجب تغییرات آناتومیکی ازجمله توسعه ریشه وافزایش سطح برگ گردد.                                                                                                              

هیکلنتون وجولیف (1978) نتیجه گرفتندکه اثرات مثبت غنی سازی هوابا₂CO ازنظرافزایش عملکردنه تنهاازطریق افزایش فتوسنتزورشدبلکه ازتغییراتی که درظرفیت ذاتی سیستمهای فتوسنتزی برای استفاده از₂COایجادمیگردد،نیزناشی میشود.                                                

مهمترین مانع جذب مقاومت روزنه ای است که وقتی مقداردی اکسیدکربن افزایش می یابد، کاهش می یابد. سطوح دی اکسیدکربن بالاجذب ₂CO راتوسط سلولهای گاردوتوسط بافت تحریک وبدین ترتیب باانتقال یون برایATPرقابت میکند.ATPجریان ₊ Kومحتوای سلولهای گاردراکاهش می دهدکه درنتیجه دی اکسیدکربن باسهولت بیشتری جذب میشود.

جذب₂CO تادیواره سلولهای فتوسنتزکننده یک عمل فیزیکی است وتنهابراساس شیب غلظت صورت میگیرد. حال غلظت دی اکسیدکربن درجو بالاترباشدبه ترتیب مقاومتهای لایه مرزی * مقاومت روزنه ای ومقاومت فضاهای بین سلولی کاهش یافته و₂CO آسانترواردگیاه میشود

درفازمایع آنزیمی که ( روبیسکو) کاتالیزواکنش گازکربنیک با RUBP*راباعث میشودمیل ترکیبی نسبتاً کمی باگازکربنیک دارد. بنابراین سرعت فتوسنتزشدیداً به غلظت گازکربنیک درسیتوزل سلول واسترومای کلوپلاست وابسته است.  

فهرست مطالب :

مقدمه
اثرافزایشی گاز 2Co برروی فرایندهای زیستی گیاه
2CO و ارتباط آن با تولید محصولات زراعی
اثر عوامل محیطی در جذب 2CO به وسیله گیاه
اعمال مدیریت‌های لازم جهت جذب بیشتر2CO بوسیله گیاه
روند افزایشی 2CO در اتمسفر و واکنش گیاه نسبت به آن
ساختن یک دستگاه ترریق CO2
افزایش دی اکسید کربن
تئوری مدرنCO2 افزاینده
اثرات گلوبال انرژی خورشیدی
انرژی خورشیدی و تکنولوژی مدرن
دی اکسید کربن
کربن در اقیانوس
پدیده دی اکسیدکربن
مزیت درختکاری
تغییرات آب و هوای اقلیمی در اثر افزایش اسیددوکربن اتمسفر
پیشنهادات
منابع و مأخذ
جداول
نمودار
تصاویر

دانلود مقاله ISI شبیه سازی دینامیک مولکولی از غشاهای زیستی و پروتئین های غشای با استفاده از الگوریتم نمونه کنفورماسیونی افزایش

اختصاصی از حامی فایل دانلود مقاله ISI شبیه سازی دینامیک مولکولی از غشاهای زیستی و پروتئین های غشای با استفاده از الگوریتم نمونه کنفورماسیونی افزایش دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

موضوع فارسی :شبیه سازی دینامیک مولکولی از غشاهای زیستی و پروتئین های غشای با استفاده از الگوریتم نمونه کنفورماسیونی افزایش

موضوع انگلیسی :<!--StartFragment -->

Molecular dynamics simulations of biological membranes and membrane proteins using enhanced conformational sampling algorithms☆

تعداد صفحه :17

فرمت فایل :PDF

سال انتشار :2015

زبان مقاله : انگلیسی

در این مقاله روش های مختلف افزایش یافته نمونه ساختاری و مدل های حلال / غشاء صریح و روشن / ضمنی، و همچنین برنامه های اخیر خود را به کاوش در ساختار و دینامیک غشاء و پروتئین های غشای. شبیه سازی دینامیک مولکولی تبدیل به یک ابزار ضروری برای بررسی مشکلات بیولوژیکی و موفقیت خود را متکی بر مدلهای مولکولی مناسب همراه با EF فی کافی روش های نمونه گیری ساختاری. نمایندگی ضمنی از محیط حلال / غشاء تقریب منطقی به مدل تمام اتم صریح و روشن، توجه به تعادل هزینه های محاسباتی و دقت شبیه سازی است. مدل های ضمنی می تواند به راحتی با ماکت تبادل روش دینامیک مولکولی ترکیب برای کشف یک فضای ساختاری گسترده تر از یک پروتئین است. سایر مدل مولکولی و روش های نمونه گیری ساختاری افزایش نیز بهاختصار مورد بحث است. به عنوان نمونه برنامه، ما مطالعات شبیه سازی اخیر glycophorin A، فسفات-lamban، پروتئین پیش ساز آمیلوئید، و دو لایه لیپیدی مخلوط معرفی و بحث در مورد دقت و بهره وری از هر مدل شبیه سازی و روش. پروتئین غشایی: این مقاله بخشی از یک موضوع خاص تحت عنوان است. ویراستاران مهمان: J.C. Gumbart و سرگئی نوسکوف.
© 2015 منتشر شده توسط الزویر B.V.

مدیریت سنتی تنوع زیستی کشاورزی

اختصاصی از حامی فایل مدیریت سنتی تنوع زیستی کشاورزی دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

 چکیده : امروزه تنوع زیستی کشاورزی، به شکل های گوناگونی رو به نابودی است که نه تنها گیاهان، حیوانات و بوم نظام های کشاورزی در حال انقراض اند، بلکه فرهنگ های سنتی موجود نیز در بسیاری از نقاط جهان در حال اضمحلال هستند. عملیات کشاورزی به شیوه ی سنتی که از قبل وجود داشته و همچنان ادامه دارد، تأثیری قابل توجه بر آینده ی گونه های وحشی و زراعی داشته است. در حال حاضر، تلاش های گوناگونی برای حفاظت از تنوع زیستی کشاورزی در حال شکل گیری است که به نظر کافی نمی رسد. مدیریت سنتی تنوع کشاورزی در جوامع کشاورزی، یک راه حل حد واسط است که می تواند به عنوان یک سازوکار مؤثر در جهت حفظ این منابع ارزشمند مورد استفاده قرار گیرد. کشاورزان سنتی علاوه بر اعمال مدیریت مستقیم بر تنوع گیاهی، از طریق مجموعه فعالیت هایی نظیر: انتخاب مکان، آیش گذاری و تناوب، استفاده از مواد اصلاح کننده، غرقاب، سوزاندن، مالچ گذاری، استفاده از بسترهای مناسب و دستکاری در سایه ی موجود به مدیریت محیط و به خصوص مدیریت خاک می پردازند که برخی از این مدیریت ها آثار مثبتی روی تنوع زیستی کشاورزی داشته و در بلندمدت نیز پایدار بوده اند. لذا مقاله ی حاضر که به روش مروری تدوین شده است در پی آن بوده است که اهمیت مدیریت سنتی کشاورزی را در جهت حفظ و بهبود کیفیت تنوع زیستی کشاورزی بررسی نماید.

 واژه های کلیدی:  دانش سنتی، تنوع زیستی کشاورزی، مدیریت منابع کشاورزی

پایان نامه بررسی اثر بوریک اسید بر مورفولوژی و توان زیستی سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان رت

اختصاصی از حامی فایل پایان نامه بررسی اثر بوریک اسید بر مورفولوژی و توان زیستی سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان رت دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

فرمت فایل : WORD (قابل ویرایش)

تعداد صفحات:146

پایان نامه کارشناسی ارشد رشته بیوشیمی

 فهرست مطالب:

فصل اول: کلیات و هدف
1    1-1    سلول¬های بنیادی ............................................................................................................................................
1    1-1- 1 تعریف سلول¬های بنیادی.........................................................................................................................
2    1-1-2 ویژگی خودنوزایی سلول بنیادی.............................................................................................................
3    1-1-3 دسته¬بندی سلول¬های بنیادی بر اساس توان تمایزی آنها ................................................................
4    1-1-4 دسته¬بندی سلول¬های بنیادی بر اساس منشا ......................................................................................
4    1-1-4-1 سلول¬های بنیادی جنینی.....................................................................................................................
6    1-1-4-2 سلول بنیادی خون بند ناف.................................................................................................................
7    1-1-4-3 سلولهای بنیادی بزرگسالان.................................................................................................................
10    1-1-5 سلول¬های مغز استخوان ...........................................................................................................................
10    1-1-5-1 سلول¬های بنیادی خونساز....................................................................................................................
11    1-1-5-2 سلول مزانشیم مغز استخوان...............................................................................................................
12    1-2    تاریخچه سلول بنیادی مزانشیم ..................................................................................................................
13    1-2-1 مورفولوژی سلول بنیادی مزانشیم ..........................................................................................................
14    1-2-2 کنام سلول بنیادی مزانشیم مغز استخوان ...........................................................................................
15    1-2-3 ویژگی¬های اساسی سلول بنیادی مزانشیم ...........................................................................................
16    1-3    کاربردهای سلول بنیادی مزانشیم در درمان ............................................................................................
17    1-3-1 ترمیم استخوان ...........................................................................................................................................
17    1-4 بافت استخوان .................................................................................................................................................
20    1-5 استئوژنز(استخوان‌سازی) ..............................................................................................................................
21    1-5-1 استخوان¬سازی اولیه یا جنینی ................................................................................................................
23    1-5-2 استخوان¬سازی ثانویه ................................................................................................................................
23    1-5-3 دوباره¬سازی استخوان ................................................................................................................................
24    1-6 هتروژن بودن کشت سلول بنیادی مزانشیمی ...........................................................................................
25    1-6-1 شرایط آزمایشگاهی تمایز مزانشیم به استخوان ..................................................................................
25    1-6-2 تنظیم مولکولی تمایز به استخوان سلول‌های بنیادی مزانشیمی .....................................................
27    1-6-3 نقش سیگنال دهی Wnt در تمایز سلول های بنیادی مزانشیم به استخوان ..............................
29    1-7 عنصر بور ..........................................................................................................................................................
30    1-7-1 مشتقات بور .................................................................................................................................................
32    1-7-2 فراوانی عنصر بور ........................................................................................................................................
32    1-7-3 تاریخچه مصرف بور ...................................................................................................................................
33    1-7-4 منابع طبیعی بور..........................................................................................................................................
34    1-7-5 اثرات بور برفلزات ضروری برای متابولیزم در جانوران .......................................................................
34    1-7-5-1 تاثیر بور بر فیزیولوژی بدن ................................................................................................................
36    1-7-5-2 تاثیر بور بر روی سرین پروتئازها .......................................................................................................
37    1-7-6 کاربرد بور در دارو .....................................................................................................................................
37    1-7-7 سرطان .........................................................................................................................................................
39    1-8 اثرات بور روی استخوان ................................................................................................................................
40    1-9 بور و خون .........................................................................................................................................................
41    1-10 بور در گیاهان ................................................................................................................................................
42    1-11 سمیت بور ......................................................................................................................................................
44    1-12 محدوده استفاده بور .....................................................................................................................................
45    مروری بر مطالعات گذشته .....................................................................................................................................
47    هدف مطالعه .............................................................................................................................................................
    
    فصل دوم: مواد و روش¬ها
50    2-1  انتخاب رت ......................................................................................................................................................
50    2-2 جدا سازی وتکثیر سلول‌های بنیادی مزانشیم مغز استخوان ................................................................
52    2-2-1 اجرای پاساژ ................................................................................................................................................
54    2-3 اثبات مزانشیم بودن سلول های استخراج شده ........................................................................................
54    2-3-1 تمایز به استخوان ......................................................................................................................................
55    2-4 بررسی توان زیستی سلولها (دوز فایندینگ) .............................................................................................
55    2-4-1  رنگ آمیزی تریپان بلو .............................................................................................................................
57    2-4-2  سنجش تترازولیوم (MTT) ...................................................................................................................
57    2-4-2-1 مراحل انجام سنجش MTT)غیر استئوژنیک( .............................................................................
58    2-4-2-2  ترسیم منحنی استاندارد با استفاده از سنجش تترازولیوم .........................................................
59    2-4-2-3 مراحل انجام تست MTT استئوژنیک ............................................................................................
60    2-5  انتخاب دوز مورد نظر ...................................................................................................................................
60    2-6 بررسی توان تکثیری سلول¬های بنیادی مزانشیم .....................................................................................
61    2-6-1 سنجش توانایی کلونی¬زایی .......................................................................................................................
63    2-6-2 محاسبه تعداد دوبرابرشدگی جمعیتی(PDN) ...................................................................................
62    2-7 بررسی تغییرات مورفولوژیکی با استفاده از رنگ آمیزی فلوروسنت .....................................................
65    2-8 آزمون¬های بیوشیمیایی در شرایط تمایز و غیرتمایزی ............................................................................
65    2-8-1تیمار و استخراج عصاره سلولی .................................................................................................................
65    2-8-2 بررسی فعالیت آنزیم¬ها ..............................................................................................................................
66    2-8-2-1 تهیه ی نمودار استاندارد برای آزمایش لاوری ...............................................................................
66    2-8-2-2 ترانس آمینازها .....................................................................................................................................
68    2-8-2-3 لاکتات دهیدروژناز................................................................................................................................
70    2-8-2-4 آنزیم آلکالین فسفاتاز ...........................................................................................................................
72    2-8-3 سنجش میزان رسوب ماتریکس معدنی به کمک رنگ آلیزارین رد در سلول های استئوژنیک
72    2-8-3-1  رسم منحنی استاندارد برای رنگ آمیزی آلیزارین رد .................................................................
73    2-8-3-2  بررسی رسوب ماتریکس استخوانی در نمونه های تیمار شده ...................................................
73    2-8-4  بررسی الکترولیت ها )کلسیم، سدیم و پتاسیم( ...............................................................................
73    2-8-4-1 بررسی میزان کلسیم داخل سلولی با استفاده از کیت کلسیم به روش رنگ سنجی ............
74    2-8-4-1-1 مراحل  انجام تست کلسیم در سلول های تمایز یافته )استئوبلاست( ................................
75    2-8-4-1-2 مراحل انجام اندازه¬گیری میزان کلسیم ......................................................................................
76    2-8-4-2 اندازه¬گیری غلظت سدیم و پتاسیم سلول استئوژنیک و غیر استئوژنیک ................................
81    2-9 تجزیه و تحلیل آماری داده ها ......................................................................................................................
    
    فصل سوم: نتایج
82    3-1 الف: نتایج مرحله اول ....................................................................................................................................
82    3-1-1  رشد و تکثیر سلولهای بنیادی مزانشیم ..............................................................................................
82    3-1-2  اثر اسید بوریک بر توانایی زیستی سلولهای بنیادی مزانشیم مغز استخوان رت ........................
85    3-1-3  بررسی مورفولوژی سلولهای تیمار شده ...............................................................................................
87    3-1-4  نتایج توانایی کلونی زایی، تعداد دوبرابر شدگی جمعیت سلول .....................................................
89    3-1-5  اثر اسید بوریک بر فاکتورهای بیوشیمیایی ........................................................................................
91    3-1-6  میزان الکترولیتها.......................................................................................................................................
92    3-2  نتایج اثر دوزهای انتخابی اسید بوریک بر شاخص های تمایز به استئوبلاست ................................
92    3-2-1 توانایی زیستی سلولها در روند تمایز .....................................................................................................
93    3-2-2 بررسی تغییرات مورفولوژیکی با استفاده از رنگ¬آمیزی فلورسنت در نمونه¬های  استئوژنیک
96    3-2-3 بررسی اثر اسید بوریک بر فاکتورهای بیوشیمیایی سلولهای تمایز یافته ......................................
97    3-2-3-1  میزان معدنی شدن ماتریکس با سنجش رنگ آلیزارین رد ........................................................
100    3-2-3-2  میزان رسوب کلسیم ..........................................................................................................................
101    3-2-3-3  بررسی فعالیت آنزیم آلکالین فسفاتاز .............................................................................................
101    3-2-3-2 بررسی فعالیت آنزیم آسپارتات و آلانین ترانس آمیناز .................................................................
103    3-2-3-5  بررسی فعالیت لاکتات دهیدروژناز ..................................................................................................
103    3-2-3-6  بررسی سطح الکترولیت های سلولهای استئوژنیک .....................................................................
    

    فصل چهارم: بحث و نتیجه¬گیری
105    4-3 اثر اسیدبوریک بر سلولهای مزانشیم ...........................................................................................................
105    4-1-1اثر اسید بوریک بر توانایی زیستی و توان تکثیر سلولها ......................................................................
108    4-1-2 بررسی تاثیر اسید بوریک بر تغییرات مورفولوژیکی ...........................................................................
109    4-1-3 اثر اسید بوریک بر فاکتورهای بیوشیمیایی ..........................................................................................
113    4-1-4  اثر اسید بوریک بر فعالیت آنزیمهای متابولیکی ................................................................................
116    4-2  اثر اسیدبوریک بر تمایز سلولی ..................................................................................................................
116    4-2-1 توانایی زیستی ............................................................................................................................................
119    4-2-2 بررسی سطح الکترولیت ها ......................................................................................................................
120    4-2-3  بررسی فاکتورهای استئوژنیک ...............................................................................................................
124    4-2-4  بررسی اثر اسید بوریک بر آنزیم های متابولیکی ...............................................................................
127    4-2-5  تاثیر اسید بوریک بر مورفولوژی سلولهای تمایزی ............................................................................
128    4-3  نتیجه گیری ...................................................................................................................................................
129    4-4 پیشنهادات ........................................................................................................................................................
    
    فصل پنجم:ضمیمه
131    5-1 روش تهیه محیط کشت ...............................................................................................................................
131    5-2  تهیه ی فسفات بافر سالین PBS- ...........................................................................................................
132    5-3 تهیه ی فسفات بافر سالین مثبت PBS+..................................................................................................
132    5-4 روش تهیه محیط تمایزی استئوژنیک ........................................................................................................
133    5-5  آماده سازی آلیزارین رد ...............................................................................................................................
133    5-6  روش تهیه محلول تریپان¬بلو 4/0 درصد ...................................................................................................
133    5-7  تهیه کریستال ویولت ....................................................................................................................................
133    5-8 روش تهیه محلول   MTT...........................................................................................................................
133    5-9  روش تهیه بافر شست و شو(  ( Tris-Hcl-NaCl..............................................................................
133    5-10 مواد لازم و روش تهیه بافر  استخراج ( Tris-Hcl) ...........................................................................
134    5-11 روش تهیه بافر ARS .................................................................................................................................
134    5-12 روش تهیه محلول BSA ...........................................................................................................................
134    5-13   روش تهیه محلول کمپلکس لاوری ......................................................................................................
135    5-14  روش تهیه بافر استخراج کلسیم .............................................................................................................
135    5-15 روش تهیه رنگ های فلورسنس هوخست و آکریدین اورنژ ................................................................

  

فهرست اشکال
2    شکل1-1: توانائی خودنوزائی و پتانسیل تمایز در سلولهای بنیادی ..............................................................
4    شکل 1-2: دسته¬بندی سلول¬های بنیادی براساس پتانسیل تمایزی آنها ....................................................
5    شکل 1-3: تصویر شماتیک از سلول¬های بنیادی جنینی ...............................................................................
6    شکل 1-4: نمایی از بند ناف و ژله وارتون ..........................................................................................................
11    شکل 1-5: سلول بنیادی خون‌ساز ......................................................................................................................
13    شکل 1-6: عملکردهای اصلی سلول بنیادی مزانشیم .....................................................................................
14    شکل1-7: مورفولوژی فیبروبلاستی سلول‌های بنیادی مزانشیمال از مغز استخوان ..................................
15    شکل 1-8: کنام سلول‌های بنیادی مغز استخوان .............................................................................................
16    شکل 1-9: کاربرد سلول بنیادی مزانشیم در درمان ........................................................................................
17    شکل1-10: استفاده از سلول بنیادی مزانشیم در ترمیم جراحات استخوان ..............................................
18    شکل1-11: ساختمان استخوان ...........................................................................................................................
19    شکل1-12: منشا سلول‌های تشکیل دهنده استخوان .....................................................................................
22    شکل 1-13: فرآیند استخوانی شدن درون غضروفی .......................................................................................
22    شکل 1-14: استخوان‌سازی درون‌غشایی ...........................................................................................................
24    شکل1-15: دوباره‌سازی استخوان، جذب استخوان .........................................................................................
26    شکل1-16: مراحل فرآیند استئوژنیک و ژنهای کنترلی آن ...........................................................................
27    شکل1-17: تصویر شماتیک از مسیر سیگنال دهی Wnt ............................................................................
29    شکل 1-18: جایگاه بور در جدول تناوبی عناصر ..............................................................................................
30    شکل 1-19: اسید بوریک .....................................................................................................................................
35    شکل 1-20: کمپلکس دی آدنوزین فسفات با بور ...........................................................................................
36    شکل 1-21 : میانکنش بور با جایکاه فعال آنزیم سرین پروتئاز ....................................................................
37    شکل1- 22: آنتی بیوتیک تارترولون ...................................................................................................................
39    شکل1- 23: Bortezomib ...............................................................................................................................
42    شکل 1-24: شکلگیری کمپلکس رامنوگالاکتورونات در دیواره سلولی گیاهان ........................................
51    شکل 2-1: انجام فلش اوت مغز استخوان ..........................................................................................................
52    شکل 2-2 نحوه قرار دادن فلاسک به انکوباتور .................................................................................................
53    شکل 2-3: لام نئوبار ..............................................................................................................................................
55    شکل 2-4: ساختار آلیزارین رد ............................................................................................................................
55    شکل 2-5: ماتریکس استخوانی رنگ آمیزی شده با آلیزارین رد...................................................................
56    شکل 2-6: ساختار تریپان بلو ..............................................................................................................................
57    شکل 2-7: تغییر رنگ MTT بر اثر آنزیم¬های میتوکندریایی و تولید بلور فورمازان ..............................
58    شکل 2-8: دستگاه ELISA READER .....................................................................................................
59    شکل 2-9: نمودار استاندارد MTT ....................................................................................................................
61    شکل 2-10: توانایی تشکیل کلونی (CFA) .....................................................................................................
61    شکل 2-11: ساختمان کریستال ویولت .............................................................................................................
64    شکل 2-12: میکروسکوپ فلورسانس المپوس .................................................................................................
64    شکل 2-13: ساختار رنگ فلورسنس هوخست .................................................................................................
64    شکل 2-14: ساختار رنگ فلورسنت آکریدین اورنژ .........................................................................................
66    شکل 2-15: نمودار استاندارد لاوری ...................................................................................................................
67    شکل 2-16: آسپارتات آمینوترانس¬آمیناز ...........................................................................................................
67    شکل 2-17 آلانین ترانس آمیناز...........................................................................................................................
68    شکل2-18 کیت های آنزیمی ALT، AST و ALP ...................................................................................
69    شکل2-19 : لاکتات دهیدروژناز ..........................................................................................................................
    شکل 2-20: منحنی استاندارد آنزیم های اکسیدوردوکتاز................................................................
70    شکل 2-21: آلکالین فسفاتاز..................................................................................................................................
72    شکل 2-22: غلظت های مشخص مورد استفاده در رسم منحنی استاندارد ...............................................
72    شکل 2-23: نمودار غلظت های مشخص از رنگ آلیزارین رد .......................................................................
76    شکل  2-24: دستگاه اسپکتوفتومتر ....................................................................................................................
77    شکل2-25 : نمای شماتیک دستگاه فلیم فتومتر ............................................................................................
78    شکل2-26: دستگاه فلیم  فتومتر ........................................................................................................................
79    شکل2-27: نمودار استاندار سدیم .......................................................................................................................
79    شکل2-28: نمودار استاندارد پتاسیم ...................................................................................................................
83    شکل3-1. مراحل رشد سلول‌های بنیادی مزانشیم طی پاساژ‌های مختلف ................................................
86    شکل 3-2. رنگ آمیزی فلورسنت سلول های با فلورسنس رنگ هوخست ................................................
87    شکل 3-3. رنگ آمیزی سلول بنیادی مزانشیم تمایزیافته با  رنگ  آکریدین اورنژ .................................
88    شکل 3-4: تصاویر میکروسکوپی و ماکروسکوپی کلونی های تشکیل شده ................................................
95    شکل 3-5 رنگ آمیزی فلورسنت سلول های بنیادی تمایزیافته با فلورسنس رنگ هوخست ................
96    شکل 3-6. رنگ آمیزی فلورسنت سلول های بنیادی تمایز یافته با فلورسنس رنگ آکریدین اورنژ
98    شکل 3-7A:تصاویر ماکروسکوپی ماتریکس¬های رنگ¬آمیزی شده با آلیزارین رد ......................................
99    شکل 3-7B: تصاویر میکروسکوپی ماتریکس¬های رنگ¬آمیزی شده با آلیزارین رد ....................................
115    شکل 4-1: نمای شماتیک تغییرات بیوشیمیائی احتمالی در روندکاهش متابولیزم گلوکز..............


فهرست جداول    
جدول1-1: سلول‌های مشتق شده از سلول‌های خون‌ساز و مزانشیم مغز استخوان .........................    12
جدول1- 2: منابع طبیعی بور ..............................................................................................................................    33
جدول1- 3: غلظت بور در بافت های مختلف ...................................................................................................    43
جدول1-4: وابستگی جذب بور به جنس و وزن ...............................................................................................    44
جدول 3-1  مقایسه میانگین توانایی زیستی سلول ها با رنگ¬آمیزی تریپان¬بلو ......................................    84
جدول 3-2 مقایسه میانگین توانایی زیستی سلول با تست MTT .............................................................    85
جدول3-3 مقایسه میانگین قطر هسته و  مساحت سیتوپلاسم سلو لهای بنیادی مزانشیم..........    87
جدول3-4 مقایسه میانگین تعداد و قطر کلونی های تشکیل شده توسط سلولهای مزانشیم..........    89
جدول 3-5 مقایسه میانگین تعداد دوبرابرشدگی جمعیت سلول های بنیادی مزانشیم ....................    89
جدول 3-6 مقایسه میانگین فعالیت (IU/L) آنزیم های (AST)،  (ALT)، (LDH) و (ALP) سلول¬های بنیادی مزانشیم ....................................................................................................................................    91
جدول 3-7 مقایسه میانگین میزان کلسیم، سدیم و پتاسیم داخل سلولی مزانشیم ................................    92
جدول 3-8 مقایسه میانگین توانایی زیستی سلول های استئوژنیک با تست MTT ..............................    93
جدول 3-9 مقایسه میانگین قطر هسته (میکرومتر) سلو لهای استئوژنیک ...............................................    94
جدول 3-10 مقایسه میانگین مساحت سیتوپلاسم سلو لهای استئوژنیک ................................................    94
جدول 3-11 مقایسه میانگین میزان رنگ (میلی¬گرم) آلیزارین رد استخراج شده از سلول های استئوژنیک    97
جدول 3-12 مقایسه میانگین میزان کلسیم (میلی¬گرم بر دسی¬لیتر) در نمونه¬های استئوژنیک    100
جدول 3-13 مقایسه میانگین میزان فعالیت آنزیم ALP (IU/L)در نمونه های استئوژنیک ...............    101
جدول 3-14 مقایسه میانگین میزان فعالیت آنزیم AST (IU/L)در نمونه های  استئوژنیک ..............    102
مقایسه میانگین میزان فعالیت آنزیم ALT (IU/L)در نمونه های استئوژنیک ........................................    102
جدول 3-16 مقایسه میانگین میزان فعالیت آنزیم LDH (IU/L)در نمونه های استئوژنیک ..............    103
جدول 3-17 مقایسه میانگین میزان سدیم در نمونه های استئوژنیک .......................................................    104
جدول 3-18مقایسه میانگین میزان پتاسیم در نمونه های استئوژنیک ......................................................    104

چکیده
مقدمه: بور ریز مغذی ضروری برای گیاهان است و مطالعات نشان داده که این عنصر می تواند به عنوان یک ریزمغذی برای حیوانات و انسان نیز محسوب شود. در این پژوهش به منظور درک بهتر از نقش  بور، اثر دوزهای مختلف اسید بوریک بر توانایی حیات، تکثیر، تمایز و فاکتورهای بیوشیمیائی سلولهای بنیادی مزانشیم مغز استخوان رت (MSCs) مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش¬ها: MSCs تا سه پاساژ کشت و برای بررسی توان تکثیر و تمایز در محیط-های کشت فاقد ترکیبات استئوژنیک و واجد ترکیبات استئوژنیک آلوده به اسید بوریک قرار داده شد. در بخش اول که شامل بررسی توانائی تکثیر میشود، توانایی حیات با کمک تست MTT و تریپان بلو در زمانهای 12، 24و 36 ساعت  بررسی و دوزهای 6 نانو، میکرو و میلی¬گرم بر میلی-لیتر اسید بوریک و زمان 36 ساعت جهت انجام مطالعه انتخاب گردید. در ادامه، توانائی تکثیر با استفاده از توانایی تشکیل کلونی (CFA) و دو برابرشدگی جمعیتی (PDN)، مورفولوژی سلول ها توسط رنگ آمیزی فلوروسنس، سطح الکترولیت¬های سدیم، پتاسیم با استفاده از فلیم فتومتر و میزان کلسیم، میزان فعالیت آنزیم¬های LDH، ALP ،AST  و ALT توسط کیتهای تجاری ارزیابی شد. در بخش دوم که شامل بررسی توانائی تمایز میشود، تاثیر دوز 6 نانو و میکروگرم بر میلی¬لیتر به عنوان دوزهای منتخب در زمانهای 5، 10، 15 و 21 روز بر توانایی زیستی، مورفولوژی، سطح الکترولیتها و فعالیت آنزیم هایLDH ،AST  و ALT در سلول ها تمایز یافته بررسی شد. میزان تمایز با استفاده از روش کمی آلیزارین رد، غلظت کلسیم و فعالیت آنزیم ALP مورد ارزیابی قرار گرفته و داده ها توسط روش آماری ANOVA، آزمون tukey آنالیز و p<0/05 به عنوان سطح معنی دار در نظر گرفته شد. نتایج:  نتایج بدست آمده نشان داد که در سلول های مزانشیم میزان توانایی زیستی در دوز و زمان کم تغییر نمی کند، اما افزایش در هر دو فاکتور زمان و دوز، کاهش فعالیت آنزیم¬های متابولیکی و متعاقبا حیات را بدنبال داشت. در سلول¬های استئوژنیک فقط در دوز بالا و با گذشت زمان منجر به کاهش توانایی حیات سلولی شد و دوز 6 نانوگرم هیچ اثری بر روی توانایی حیات نشان نداد ضمنا فاکتورهای تمایزی، الکترولیتها و آنزیمهای متابولیکی با افزایش زمان فقط در دوز 6 نانوگرم افزایش یافت. نتیجه گیری: تاثیر اسید بوریک به نوع سلول و شرایط تیمار وابسته است به گونه ای که در این مطالعه نشان داده شد که حساسیت سلول¬های مزانشیم نسبت به سلول¬های استئوبلاست بیشتر است. علاوه بر این دوز پایین اسیدبوریک دارای تاثیر مثبتی بر روند تمایز استخوان بود، لذا دوزهای پایین اسید بوریک می تواند نقش مفیدی بر سلامت سلول های مزانشیم و تمایز آنها به استئوبلاست داشته باشد.
کلید واژه¬ها: سلول ¬های بنیادی مزانشیم مغز استخوان، اسید بوریک، قابلیت حیات، آنزیم¬های متابولیکی، تمایز