فرمت فایل : WORD (قابل ویرایش)
تعداد صفحات:87
پایان نامه برای دریافت درجه کارشناسی ارشد در رشته زیست شناسی (M.A)
گرایش: میکروبیولوژی
فهرست مطالب:
عنوان شماره صفحه
چکیده 1
فصل اول: کلیات تحقیق
1-1- مقدمه 3
1-2- هدف از انجام این تحقیق 5
1-3- پیگمان های میکروبی 5
1-3-1 تعریف پیگمان های میکروبی 5
1-3-2 تقسیم بندی پیگمان ها 6
1-3-2-1 ریبوفلاوین 6
1-3-2-2 کانتاگزانتین 6
1-3-2-3 کارتنوئیدها 6
1-3-2-4 پرودیجیوسین 7
1-3-2-5 فیکوسیانین 7
1-3-2-6 ویولاسئین 7
1-3-2-7 آستاگزانتین 7
1-3-3 فاکتورهای موثر در تولید پیگمان میکروبی 8
1-3-3-1 دما 8
1-3-3-2 PH 8
1-3-3-3 منبع کربن 8
1-3-3-4 منبع نیتروژن 8
1-3-3-5 نوع تخمیر 8
1-3-3-6 مواد معدنی 8
1-3-4 پایداری پیگمان های میکروبی 9
1-3-5 میکروب های مولد پیگمان 9
1-3-5-1 باکتری ها 9
1-3-5-2 قارچ ها 10
1-3-5-3 گلسنگ ها 11
1-3-5-4 مخمرها 11
1-3-5-5 جلبک ها 11
1-3-6 کاربردهای پیگمان های میکروبی 12
1-3-6-1 داروسازی 12
1-3-6-2 مواد غذایی 14
1-3-6-3 پزشکی 14
1-3-6-4 دیگر کاربردها 15
1-4- تعریف SPF 15
1-4-1 ضریب یا عیار حفاظتی 18
1-4-2 حداقل مقدار اشعه ماورا بنفش ایجاد کننده قرمزی پوست (MED) 18
1-4-3 ضریب یاعیار حفاظتی میانگین 19
1-4-4 ضریب یا عیار حفاظتی برچسب 19
1-4-5 ضریب حفاظتی آزمون شده (TEST) 19
1-5- کاربرد و مزایای کرمهای ضد آفتاب 19
فصل دوم: ادبیات و پیشینه تحقیق
2-1- پیشینه تحقیقات انجام شده 22
فصل سوم: مواد و روش ها
3-1- تجهیزات و مواد مورد نیاز 27
3-1-1 تجهیزات دستگاهی 27
3-2- مواد 28
3-3- اجزاء محیط های کشت مورد استفاده و روش های تهیه آنها 28
3-3-1 محیط کشت TSA 28
3-3-2 محیط کشت WATER AGAR 29
3-3-3 محیط کشت PDA 29
3-3-4 محیط کشت YGC(YEAST EXTRACT CHLORAMPHENICOL AGAR) 29
3-4- نمونه گیری 29
3-4-1 نمونه گیری از هوا و کشت نمونه 29
3-4-2 نمونه گیری از خاک و کشت نمونه 30
3-4-3 نمونه گیری از آب و کشت نمونه 30
3-4-4 نمونه های گرفته شده از سطح برگ و گل و کشت آنها 31
3-4-5 نمونه برداری از گلسنگ های استان کرمان 31
3-5- خالص سازی باکتری ها و قارچ های جدا سازی شده در مراحل غربالگری 31
3-6- نگهداری سویه های قارچی و باکتریایی 31
3-6-1 نگهداری کوتاه مدت 31
3-6-2 نگهداری طولانی مدت جدایه های قارچی و باکتریایی 31
3-7- ارزیابی تولید پیگمان توسط جدایه ها 32
3-7-1 جدایه های قارچی 32
3-7-2 جدایه های باکتریایی 32
3-8- استخراج پیگمان از توده های زیستی مورد مطالعه بدست آمده در مرحله غربالگری 32
3-9- آماده سازی محلولی از پیگمانهای تهیه شده برای تهیه طیف اسپکتروفتومتریمورد نظر برای آنالیزهای دستگاهی 33
3-10- خشک کردن پیگمان های محلول 34
3-10-1 خشک کردن در انجماد و سرما (لیوفیلیزاسیون) 34
3-10-2 خشک کردن در دمای محیط 34
3-11- ارزیابی جذب اشعه ماوراءبنفش توسط محلول های رنگی تهیه شده از پیگمان های بدست آمده در مرحله غربالگری 35
3-11-1 محاسبه فاکتور محافظت در مقابل اشعه ماوراء بنفش(SPF) 35
3-12- شناسایی جدایه های قارچی مولد پیگمان های دارای توانایی جذب حداکثر اشعه ماوراء بنفش 36
3-12-1 گسترش مرطوب (WET PREPARATION) 37
3-12-2 تکنیک چسب نواری شفاف 37
3-12-3 تکنیک کشت روی لام (اسلاید کالچر) 37
3-13- تعیین هویت بیوشیمیایی سویه باکتریایی مورد نظر 38
3-14- تعیین هویت مولکولی سویه باکتریایی و قارچی مورد نظر 38
فصل چهارم: نتایج یافته های تحقیق
4-1- نتایج کشت نمونه های هوا 40
4-2- نتایج کشت نمونه های خاک 42
4-3- نتایج کشت نمونه های آب 43
4-4- نتایج کشت نمونه های گرفته شده از سطح برگ و گل 44
4-5- نتایج خالص سازی باکتری ها و قارچ های جدا سازی شده در مرحله غربالگری 45
4-6- ارزیابی موثر بودن روش های نگهداری سویه های بدست آمده در مرحله غربالگری در زنده ماندن جدایه های مورد نظر 46
4-7- نتایج ارزیابی روش های میکروسکوپی در شناسایی جدایه های قارچی 46
4-8- نتایج ارزیابی های بیوشیمیایی در جدایه باکتریایی مورد نظر 51
4-9- نتایج ارزیابی ملکولی جدایه باکتری های مورد نظر 51
4-10- نتایج ارزیابی تولید پیگمان توسط جدایه ها 52
4-11- نتایج آماده سازی پیگمان های مورد نظر برای اندازه گیری توانایی جذب اشعة U.V (تعیین فاکتور SPF) 52
4-12- نتایج خشک کردن نمونه ها در روش های خشک کردن در انجماد (لیوفیلیزاسیون) و تبخیر در دمای 37 درجه سانتی گراد 52
4-13- نتایج استخراج پیگمان از تودههای زیستی جدایه های بدست آمده در مرحله غربالگری 54
4-14- ارزیابی تعیین فاکتور SPF پیگمانهای مورد نظر 57
فصل پنجم: بحث و پیشنهادات
5-1- بحث 59
5-2- پیشنهادات 63
منابع و مآخذ 64
فهرست منابع فارسی 64
فهرست منابع انگلیسی 65
چکیده انگلیسی 71
فهرست جداول
عنوان شماره صفحه
جدول 1-1: اسامی برخی از باکتری های مولد پیگمان 9
جدول 1-2: اسامی برخی از قارچ های مولد پیگمان 10
جدول 1-3: برخی ازگلسنگ های مولد پیگمان 11
جدول 1-4: اسامی برخی از مخمرهای مولد پیگمان 11
جدول 1-5: اسامی برخی از جلبک های مولد پیگمان 11
جدول 3-1: تجهیزات دستگاهی 27
جدول 3-2: استخراج پیگمان با استفاده از حلال های مختلف 33
جدول 3-3: عملکرد محصول نرمال مورد استفاده درمحاسبهSPF 36
جدول 3-4: شناسایی¬جدایه¬های قارچی مولدپیگمان¬های دارای توانایی¬جذب حداکثراشعه ماوراء¬بنفش 36
جدول 4-1: نتایج کشت نمونه های باکتری از هوا 40
جدول 4-2: نتایج کشت نمونه های قارچی از هوا 42
جدول 4-3: نتایج کشت نمونه های باکتری از خاک 42
جدول 4-4: نتایج کشت نمونه های قارچی از خاک 43
جدول 4-5 : نتایج کشت نمونه های باکتری از آب 43
جدول 4- 6: نتایج کشت نمونه های قارچی از آب 44
جدول 4- 7: نتایج کشت نمونه های باکتریایی از سطح برگ و گل 45
جدول 3-5: تست تعیین هویت بیوشیمیایی سویه باکتریایی مورد نظر 51
جدول 4-8: نتایج استخراج پیگمان باکتری ها ازحلال های مختلف 54
جدول 4-8: نتایج استخراج پیگمان باکتری ها ازحلال های مختلف 56
جدول 4-9: تعیین فاکتور SPF پیگمان های میکروبی مورد نظر 57
فهرست شکل ها
عنوان شماره صفحه
شکل 3-1: دستگاه لیوفیلیزه جهت خشک کردن پیگمان های میکروبی 34
شکل 4-1: کشت نمونه های باکتری از هوا 41
شکل 4-2: خالص سازی قارچ ها 43
شکل 4-3: کشت نمونه های باکتری از آب 44
شکل 4-4: کشت نمونه های باکتری از محیط برگ و گل 45
شکل 4-5: گونه ای از قارچ آسپرژیلوس (قارچ 24) 46
شکل 4-6: تصویر میکروسکوپی از گونه ای آسپرژیلوس (قارچ 24) با بزرگنمایی 400 47
شکل 4-7: گونه ای از قارچ آسپرژیلوس (قارچ 11) 47
شکل 4-8: تصویر میکروسکوپی از گونه ای آسپرژیلوس (قارچ 11) با بزرگنمایی 400 48
شکل 4-9: گونه ای از قارچ پنی سیلیوم (قارچ 28) 48
شکل 4-10: تصویرهای میکروسکوپی از گونه ای پنی سیلیوم (قارچ28) با بزرگنمایی 400 49
شکل 4-11: گونه ای از قارچ اپی کوکوم (قارچ 29) 49
شکل 4-15: تصویر میکروسکوپی از گونه ای قارچ اپی کوکوم (قارچ 29) با بزرگنمایی 400 50
شکل 4-16: گونه ای از کلادوسپوریوم (قارچ 15) 50
شکل 4-17: تصویر میکروسکوپی از گونه ای قارچ کلادوسپوریوم (قارچ 15) با بزرگنمایی 400 51
شکل 4-18: پیگمان های مورد نظر برای اندازه گیری توانایی جذب اشعة U.V(تعیین فاکتور SPF) 52
شکل 4-19: پیگمان خشک حاصل از باکتری 31 53
شکل 4-20 : پیگمان خشک حاصل از قارچ24 53
شکل 4-21 :پیگمان های خشک حاصل از نمونه های (میکروارگانیسم های )مورد نظر 53
چکیده
بیشترین پیگمان¬های طبیعی امروزه از گیاهان و جانوران استخراج می¬شوند. امروزه توجه محققان به پیگمان¬های میکروبی معطوف شده است، زیرا این دست از پیگمان¬ها طبیعی بوده و کاربردهای دارویی، صنعتی، غذایی و آرایشی بهداشتی دارند. تولید پیگمان توسط میکروارگانیسم¬ها نسبت به منابع دیگر با اهمیت بوده زیرا میکروارگانیسم¬ها رشد سریع داشته، استخراج رنگدانه از آن¬ها راحت¬تر بوده، تولید آن¬ها وابستگی به شرایط جوی و خصوصیات جغرافیایی نداشته و همچنین از تنوع بالایی برخوردار بوده و تولید آن¬ها قابل کنترل بوده و محصول نهایی آن¬ها نیز قابل پیش بینی است. هدف از پروژه حاضر ارزیابی برون تنی جذب اشعه ماورای بنفش پیگمان¬های میکروبی و تعیینSPF آنها بوده است در این مطالعه پیگمان-های استخراج شده از گلسنگ توسط آمونیاک و پیگمان¬های میکروب¬های بدست آمده در مرحله غربالگری توسط حلال¬های آب، DMSO بعد از جداسازی و خشک کردن در حلال¬های مورد نظر حل شده و در 3 غلظت مختلف جذب آن¬ها در طول موج¬های بین محدوده 200 تا 700 نانومتر توسط دستگاه اسپکتروفتومتر قرائت و فاکتور محافظت از نور خورشید (SPF) در خصوص آنها محاسبه گردید نتایج نشان می¬دهد که در بین نمونه¬های مورد مطالعه پنج کپک، سه گلسنگ و یک باکتری در جذب uv کارایی خوبی داشته و از بین آنها یک باکتری و 2 کپک دارای فاکتور SPF به ترتیب 7، 272 و 140 بوده که متعلق به جنس¬های باسیل گرم منفی غیرتخمیری (عدم تعیین هویت) و پنی سیلیوم و آسپرژیلوس بوده¬اند.
واژه های کلیدی: (SPF)فاکتور محافظت از خورشی، پیگمان های میکروبی، پرتو UV)) ماورای بنفش
پایان نامه ارزیابی برون تنی پیگمان های میکروبی بدست آمده در مرحله غربالگری به منظور جاذب اشعه ماورای بنفش در کرم های ضد آفتاب